五味保肝丸中丹参酮1IAHPLC含量测定方法研究王涛1王蕾2谢旭善2张伟2（1青岛市市立医院山东青岛260012；2青岛市海慈医疗集团山东青岛260033）【】R927.2【文献标识码】A【】2095-1752（2013）27-0205-02五味保肝丸是我院传统中药制剂，丹参为组方主要药物之一。为进一步提高内在质量标准，保证临床疗效，对该复方制剂中丹参的主要药效成分丹参酮IIA含量进行测定方法研究。1仪器、试剂与药材1.1仪器Agilent1100型高效液相色谱仪（美国）;JA2003型电子分析天平（上海）；超声波清洗器:KQ100型（昆山市超声波仪器厂）。1.2试剂与药材丹参酮IIA对照品（中国药品牛物制品检定所，批号:110766-200417）,乙月青（上海化学试剂厂，色谱纯），水为超纯水，其余试剂均为分析纯。五味保肝丸和缺丹参的阴性对照样品由木院中药制剂实验室按处方工艺制备；药材取自木院中药库，经鉴定丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥干燥根和根茎。2试验方法与结果2.1色谱条件色谱柱：DOSC18柱（2504.6mm,5mu;nn）；流动相：乙月青■水（70：30）；检测波长:270nm；柱温为30°C；流速为1.0mLmin-l；理论塔板数按丹参酮IIA的峰计不低于2000。2.2对照品溶液制备精密称取丹参酮IIA对照0.4580mg,加甲醇溶解定容至lO.OmL,制成浓度为0.0458mgmLJ的对照品溶液。2.3供试品溶液的制备取五味保肝丸样品约5g,碾碎，置硅胶干燥器中干燥24小时后精密称重，置具塞锥形瓶中，甲醇50mL,称定重量；置45°C水浴中超声提---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---取35min,取出放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。取滤液2.0mL,用甲醇定容至10.0mLo即得。2.4阴性对照溶液的制备取不含丹参的五味保肝丸阴性对照品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。2.5专属性考察分别精密吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照品溶液10mu;L,注入液相色谱仪，观察色谱图。供试品与对照品在17.4min出均出现色谱峰，阴性液在此处无峰出现。表明该复方制剂其他组分对本品中丹参酮IIA含量测定无干扰，方法专属性强。2.6方法学考察2.6.1线性关系考察精密吸取浓度为0.0458mgmL-l丹参酮IIA对照品溶液1、2、3、4、5、6mu;L,按照2.1项下的色谱条件进样、测定。以对照品的进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标,进行线性冋归。结果表明，丹参酮IIA在0.0458〜0.2748mu;g之间,进样量与峰面积积分值呈良好线性关系。冋归方程为：Y二1.5334：106X+2.896：L03,r二0.9999,线性关系良好。2.6.2稳定性试验取对照品溶液，常温放置，按上述色谱条件在0、5、10、16、24h分别进样2mu;L,测定峰面积积分值。结果平均值为143355(n=5),RSD为1.18%o表明供试品溶液常温放置24h内基本稳定。2.6.3精密度实验取同一供试品溶液连续5次进样10mu;L,测定峰面积积分值。结果平均值为134576(n=5),RSD为0.92%(n二5)。表明此方法操作精密度良好。2.6.4加样冋收率实验分别精密量取5.0ml已知浓度的样品液(丹参酮IIA浓度为0.00814mgml-l置10ml容量瓶中，分别精密加入浓度为0.0458mgmL-1的对照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5、3.0ml,用甲醇定溶至lO.OmL分别进样10mu;L,测定，并计算冋收率。结果平均冋收局98.67%,RSD二1.58%。3讨论3.1指标成分的选择丹参酮IIA为五味保肝丸主要药物丹参的主要有效成分。---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---2010年版《中国药典》将丹参酮IIA含量作为丹参药材质量的评价指标[l]o因此，选择该成分含量作为该复方制剂内控质量标准之一是合理的。3.2样品提取方法丹参酮IIA为丹参的脂溶性成分，样品提取多采用甲醇超声提取[2・4]和冋流提取⑴等方法。对比试验甲醇及90%、70%、50%%浓度甲醇分别在30、45、50°C的溶剂提取效果，结果45°C甲醇提取效果最好。考察甲醇45°C超声处理30、35、40、45min及水浴加热回流提取0.5、1、1.5、2hr提取效果，结果表明甲醇45°C超声处理35min和冋流提取l・5hr后，丹参酮基本提取完全。选择更为简便实用的甲醇45°C超声处理35min为该复方制剂丹参酮IIA含量测定的样品提取方法。3.3流动相的选择五味保肝丸为复方制剂...