结直肠癌中miR106b增强肿瘤细胞放疗抵抗作用机制的初步分析

结■肠的miR-106b增强W删胞放I?抵fit作顽制删蚪析2018-03-2001:26:12中国现代医生2018年1期杨丽君万晓晨[摘要]目的探讨结直肠癌中miR-106b增强肿瘤细胞放疗抵抗作用机制。方法釆用RT-PCR技术检测结直肠癌细胞株当川的miR-106b的表达,分析英对放疗抵抗的影响。结果检测SW620细胞放疗敏感性,miFM06b过表达Z后SW620细胞的生存分数显著高于对照组(P<0.05);检测miR-106b抑制表达的SW480细胞放疗敏感性,miR・106b稳定干扰之后SW480细胞的生存分数要显著低丁对照组(PvO.05):平板克隆实验结果表明,SW620/plVTHM/miR-106b细胞增殖能力显著强于SW620/plVTHM细胞(P<0.05)o结论miR/06b可以强化细胞抵抗射线导致的DNA损伤,提高细胞修复DNA的能力,最终强化结直肠癌细胞放疗抵抗作用。[关键词]结直肠癌;miR-106b;肿瘤细胞;放疗抵抗;机制[中图分类号]R735.34[文献标识码]A[文章编号]1673-9701(2018)01-0029-03PreliminaryanalysisonthemechanismofmiR-106benhancingtheradioresistaneeoftumorcellsincolorectalcancerYANGLijunWANXiaochenClinicalLaboratory,ZhejiangHospital,Hangzhou310013,China[Abstract]ObjectiveToinvestigatethemechanismofmiR-106benhancingtheradioresistaneeoftumorcellsincolorectalcancer.MethodsTheexpressionofmiR-106bincolorectalcancercelllineswasdetectedbyRT-PCR・Itsimpactonradioresistaneewasanalyzed.ResultsTheradiosensitivityofSW620cellswasdetected.ThesurvivalscoreofSW620cellsaftermiR-106boverexpressionwassignificantlyhigherthanthatinthecontrolgroup(P<0.05);theradiosensitivityofmiR-106btoinhibittheexpressionofSW480cellswasdetected,andthesurvivalscoreofSW480cellsaftermiR-106bstableinterfereneewassignificantlylowerthanthatinthecontrolgroup(P<0.05);theresultsofplatecloningexperimentsshowedthatthecellproliferationofSW620/plVTHM/miR-106bcellswassignificantlystrongerthanthatofSW620/plVTHMcells(P<0.05)・ConclusionmiR-106bcanenhancethecellresistancetoradiation-inducedDNAdamage,improvetheabilityofcellsrepair!ngDNA.andultimatelyenhancetheradioresistaneeofcolorectalcancercells・[Keywords]Colorectalcancer;miR-106b;Tumorcells;Radioresistance;Mechanism結直肠癌发生发展同遗传因素以及环境因素等存在密切联系,统计结果显示,结直肠癌临床发病率近年来呈现出明显升高的发展趋势。当前情况下,结直肠癌患者的治疗主要是手术治疗联合辅助放疗口]。有效放疗可以杀死癌症细胞,同吋延长细胞周期,改善于•术治疗效果。不过部分患者的放疗敏感性比较低,远期效果不够理想,因此放疗抵抗作用机制成为结直肠癌研究的一个热点问题[2]。本文研究结直肠癌细胞株当中的miR-106b表达,探讨其同放疗抵抗之间的联系,现报道如下。1资料与方法1.1一般资料人结直肠癌细胞株SW480及SW620,动物小鼠购自省动物中心,3〜6周龄,雌雄各半,体重(20±2)g。恒温恒湿条件下饲养,确保无特定病原体。1.2方法1.2.1细胞培养方法SW480及SW620借助于慢病毒转染过表达或者是T扰细胞株的培养箱当中进行培养,设定温度37°C,5%的C02,细胞应用10%的牛血清RPMI-1640培养基,添加50U/mL青霉素,50mg/mL的链霉素,于37°C、5%CO2培养箱内培养,应用0.5%的胰蛋白酶进行消化传代,选取处于指数生长阶段的细胞进行实验[3]。1.2.2配置试剂细菌培养基的配制方而,LB液体培养基,主要成分为5.0g的胰蛋白腺、10.0g的酵母捉取物、5.0g的氯化钠,添加500mL去离子水之后搅拌,pH值升高至7.0,分装之后高圧灭菌储存[4]。添加抗生素当作培养基,LB固体培养基方面,在液体培养基当屮添加2.5%的琼脂粉,在高压灭菌Z后冷却,混匀Z后每个平板倒入20mL的培养基,常温条件下冷却到凝固并且使用保鲜膜进行封装[5]。1.2.3细胞辐射处理及检测使用5%的胰酶消化细胞制作得到单细胞悬液,分析细胞的浓度,接种到6孔板,在培养箱当中持续孵育9hZ后,应用Varian2300加速器进行6MV-X线照射,其中剂量率是2Gy/min,细胞覆盖1cm...

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