大黄蔥醌类化合物的组织化学定位研究刘文哲西北植物学报2000,20(6):1082—1085ActaBot.Boreal.-Occident.Sin.:1000-4025-(2000)06-1082-04大黄蔥醌类化合物的组织化学定位研宄刘文哲,张爱新12(1西北大学生命科学学院,西安710069;2西安中药集团北郊公司,西安710021)摘耍:利用新鲜材料的徙手切片直接观察、5%NaOH水溶液显色、荧光显微镜观察和戊二醛及锇酸固定薄切片法对大黄根茎蒽醌类化合物进行了组织化学定位研宂。结果发现人黄根茎内蒽醌类化合物主要积累在次生木质部的木射线和次生韧皮部的軔皮射线细胞中。根据显色程度的不同,可以判断早期形成的维管射线细胞蒽醌类化合物的含量较晚期形成的射线细胞的含量高,二年生根茎的含量高于一年生根茎的含量。关键词:大黄;根茎;组织化学;蒽醌类化合物:Q944.62文献标识码:AHistochemicallocalizationofanthraquinonesinrhizomeofRheumofficinaleBail12LIUWen-zhe,ZHANGAi-xin(HnstituteofBiology,NorthwestUniversity,Xi’an710069,China;2NorthenSuburbCom.,HaditionalChineseMedicineofXi'an'Xi'an710021,China)Abstract:LocalizationofanthraquinoneswasinvestigatedinrhizomeofRheumofficinale%NaOHsolutioncoloring,fluorescencemicroscopy,andsemi-thinsectionmethodwith5werefixedinglutaraldehydeandOsO4.Anthraquinoneswerelocatedinthevascularrayofsecondaryphloemandsecondaryxylem.Matureraycellsshoweddeepercolorthanimmatureraycellsjtsuggestedthatanthraquinonescontentwerehigherinmatureraycellsthaninimmatureraycells,andhigherinbiennialrhizomethaninannualrhizome.Keywords:RheumofficinaleBail;rhizome;histochemistry;anthraquinones收稿日期:2000-08-10基金项0:陕西省教委专项基金资助项0。作者简介:刘文哲(1964—),男(汉族),副教授,博士。主要从事药用植物的结构与有效成分积累关系的研宂。E-6期刘文哲等:大黄蒽醌类化合物的组织化学定位研究1083大黄(RheumofficinaleBail)为寥科多年生草本,其根茎为常用中药,具有泄下、抗菌、抗肿瘤、抗高血脂症、降低血压、健胃利胆、保肝强心、消炎、延缓袞老、调节免疫等作用[1,2]。目前已从大黄中分离出蒽醌、二蒽酮、芪、苯丁酮、单宁和萘等不同种类的80种化合物[1]。其中蔥醌类化合物是大黄的主要有效成分,主要包括大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酸等。关于大黄的研究,国A外已有大量的报道,但这些研究主要集中在大黄的植物化学和药理作用方妞[1-4]。而有关蔥醌类化合物的组织化学研究,仅见刘文哲等(1999)对贯叶连翘分泌结构中金丝桃素的组织化学研究报道[5]。国外只对类黄酮(flavonoids)、香豆素(coumarins)和酌类化合物(phenoliccompounds)等少数几种次生代谢产物进行了细胞化学定位研宂。木文将通过对人黄中蔥醌类化合物的组织化学定位研宂,探讨检测中药中蔥醌类化合物积累规律的组织化学方法,为开发利用含蒽醌类化合物的植物药提供有效的检测技术。[6][7][8]1材料方法药用大黄(RheumofficinaleBail)于2000年4月由陕西定边县移植于西北大学生物园内栽培。并于4月和8月2次分别取1年生和2年生根茎为研究材料。1.1新鲜材料的组织化学样品制作将大黄根茎徒手横切成薄片。A.放在载玻片上,滴水后盖上盖玻片,置显微镜下直接观察并照相;B.在A的装片上滴5%NaOH水溶液显色,置显微镜下观察各组织的显色反应并照相;C.取人黄根茎徒手横切片,放在载玻片上,滴水后盖上盖玻片,用UV为激发光源的Olympus荧光敁微镜下观察各组织所发荧光的颜色并照相。1.2半薄切片样品的制作取新鲜大黄根茎分割成1〜2mm小块,用3%戊二醛(pH7.2二甲砷酸钠缓冲液配制)和1%锇酸固定/内酮系列脱水,Epon812包埋,Reichedung超薄切片机切片,切片厚1〜2Pm,甲苯胺蓝染色,Leica显微镜观察并照相。32观察结果2.1新鲜材料的组织化学反应新鲜材料制成徒手切片,直接用显微镜观察,可发现灰色的形成层环将大黄的根茎分为N侧的木质部和外侧的韧皮部。其木质部和韧皮部主要由次生木质部和次生韧皮部构成,其中分布大量的放射状排列单列维管射线,它们与周围细胞明显不同是,它们...