广董香内生真菌DiaporthelongicollaA616细胞毒活性次级代谢产物研究［摘要］为了研究广蕾香内生真菌DiaporthelongicollaA616的活性次级代谢产物。采用正相硅胶、C18反相、SephadexLH-20凝胶、HPLC等色谱技术从该菌株的发酵产物中分离得到了10个化合物，经波谱数据分析和文献比对，分别鉴定为1,3-diamino-1,3-dimethylurea(1),(7R,9R)-7-hydroxy-9-propyl-5-nonen-9-olide(2),ergosta-5,7,22-trien-3-ol(3),(22E,24R)-ergosta-4,6,8(14)-22-tetraen-3-one(4),(22E,24R)-3B,5a-dihydroxy-6B-ergosta-7,22-diene(5),citreoisocoumarin(6),glycerolmonolinoleate(7),1-(2-hydroxyethoxy)ethyl(E)-octadec-9-enoate(8),cyclo-(L-Pro-L-Ala)(9),cyclo(L)-Pro-(L)-Vai(10),其中，化合物6~10为首次从Diaporthe属真菌中分离得到。体外细胞毒活性结果显示化合物4和5对肿瘤细胞株SF-268,MCF-7,NCI-H460和HepG-2具有显著的抑制活性，IC50分别为5.3,6.5,12.2,6.1nmol?L-l和8.2,5.2,6.1,9.4umol?L-lo[关键词]Diaporthelongicolla；内生真菌；广董香；细胞毒活性[Abstract]TostudyactivesecondarymetabolitesofendophyticfungusDiaporthelongicollaA616isolatedfromPogostemoncablin.Tencompoundswereisolatedfromfermentationproductofthestrain616bysilicageLreversephasesilicagel,Sephadex-LH20,HPLCandsoon.Theirstructureswereidentifiedas1，3-diamino-l，3-dimethylurea(1)，(7R，9R)-7-hydroxy-9-propyl-5-nonen-9-olide(2),Ergosta-5、7,22-trien-33-ol(3)，(22E,24R)-ergosta-4,6，8(14)-22-tetraen-3-one(4),(22E,24R)-3B,5a-dihydroxy-63-ergosta-7,22-diene(5),citreoisocoumarin(6),glycerolmonolinoleate(7)，1-(2-hydroxyethoxy)ethyl(E)-octadec-9-enoate(8),cyclo-(L-Pro-L-Ala)(9)，cyclo(L)-Pro-(L)-Vai(10),respectively,basedonextensivespectroscopicanalysisandliteraturecomparisons.Compounds6-10wereisolatedfromthegenusDiaportheforthefirsttime.AllisolatedcompoundswereevaluatedforinvitrocytotoxicactivitiesagainstSF-268，MCF-7，NCI-H460andHepG-2tumorcelllines.Compounds4and5showedpotentgrowthinhibitoryactivitiesagainstthefourcelllineswithIC50valuesof5.3,6.5,12.2,6.1umol?L-land8.2,5.2,6」，9.4Pmol?L-l,respectively.［Keywords］Diaporthelongicolla；endophyticfungus；Pogostemoncablin；cytotoxicactivitydoi：10.4268/cjcmm20161122广蕾香Pogostemoncablin（Blanco）Benth.是民间传统的药用植物，主要用于湿浊中阻、暑湿倦怠、胸闷不舒、寒湿闭暑、腹疼腹泻、鼻渊头痛的治疗［1］。现代研究表明，广董香含有祜类、黄酮类、生物碱类等化学成分［2］。迄今国内外对广董香的研究主要集中在其化学成分和药理活性方面，而对其内生真菌活性及其次级代谢产物的研究鲜有报道。为了从广董香内生真菌中寻找活性代谢产物，本课题组前期对分离口广董香的内生真菌进行了细胞毒、抗菌活性筛选，发现菌株DiaporthelongicollaA616的粗提物对人肝癌细胞（HepG-2）、人神经癌细胞（SF-268）＞人乳腺癌细胞（MCF-7）和人肺癌细胞（NCI-H460）有明显的抑制作用。本研究在此基础上对菌株A616的次级代谢产物进行深入研究，对该菌株的发酵粗提物进行分离纯化，得到10个单体化合物，其中化合物6〜10为首次从Diaporthe属真菌中分离得到，化合物4和5对上述4种肿瘤细胞具有显著的抑制活性。1材料1.1仪器与试剂核磁共振波谱仪500MHz（Bruker公司）；API2000LC/MS/MS质谱仪（MDSSCIEX公司）；岛津制备型高效液相色谱仪（LC-20A）（日本岛津公司）；PZ1000B旋转式大容量普通摇床（武汉瑞华仪器设备有限公司）；RE-2000型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；超净工作台（上海恒益科技有限公司）；柱色谱硅胶（100〜200目、200〜300目,青岛海洋化工厂）；GF254高效薄层硅胶板（Merck公司）；C18反相硅胶（40〜75um,FujiSilysiaChemicalLtd.）；凝胶SephadexLH-20（18~110um,AmershamBiosciencesLtd.）；其余试剂均为分析纯，购自广州化学试剂厂。1.2菌种菌株A616从广东省高...