HPLC-MS/MS法研究精制蒜氨酸中有关物质袁耀佐"，顾洁杭太俊'1,陈坚彳，张正行一(中国药科大学1.约物分析室，2.约物质址与安全预警教育部重点实验室，江苏南京210009；3.新績医科大学约学院，新贖乌鲁木齐830054；4.江苏省药品检验所，江苏南京210008)摘要：研究精制蒜氨酸样品中的有关物质。采用HPLC-MS/MS-级质谱扫描总离子流谱测定有关物质的准分子离子，并利用他们的色溝保留时间、二级质谱及/或对照品对照进行结构鉴定。全扫描总离子流谱结果表明，精制蒜氨酸中主要含7个有关物质成分.[M离子m/z分别为116,133,147,152,175及两个肌/z同为178的蒜氨酸同分异构体。其中m/z为116,133.147,175的[M+H厂离子相应的物质分别鉴定为脯氨酸、门冬酰胺、谷氨酰胺、精氨为152的[M+HJ*离子签定为甲基丄■半胱氨酸亚矶，m/z178的两个蒜氨酸同分异构体分别经二级质谱鉴定为异蒜氨酸和环蒜氨酸。将制蒜氨栽中主要有关物质分别为氨慕酸及蒜氨酸的同系物及同分异构体。关键词：蒜氨破；有关物质；HPLC・MS/MS中图分类号：R9I7文猷标识码：A文章编号：0513-4870(2007)06-0639-04RelatedsubstancesinpurifiedalliindeterminedbyHPLC-MS/MSYUANYao-zuo14,GUJie1,HANGTai-jun12*,CHENJian3,ZHANGZheng-xing'12(1・DepartmentofPharmaceuticalAnalysisf2・KeyIxiboraloryofDrugQualityControlandPharmacoviglancetMinistryofEducationtChinaPharmaceuticalUniversityNanjing210009China;3・CollegeofPharmacytXinjiangMedicalUniversityfUrumuqi830054.China:4.JiangsuInstituteforDrugControltNanjing210008tChina)Abstract：Tostudytherelatedsubstancesinpurifiedalliin9HPLC-MS/MSmethodcarriedoutonaPhenomenexNH2columnwasusedforscreenandidentificationoftherelatedsubstanceswithfullscanMSspectradeterminationoftheir[M+H]*ionsandthentheanalysesoftheretentiontime9productMSspectraand/orchemicalreferencestandards.ThefullscanHPLC-MSchromatogramshowedthatthereweresevenmajorrelatedsubstancesinthepuriGedalliinandtheirm/zofthe[M+H]*ionswithincreasingretentionwere116.133,147,152,175$178and178tseparately.Andtheywereidentifiedasproline9asparagine,glutamine9methiin,arginine,isoalliinandcycloalliin(bothwereisomersofalliin),respectively.Themajorrelatedsubstancesinpurifiedalliinareaminoacids,homologenandtheisomersofalliin.Keywords:alliin；relatedsubstances；HPLC-MS/MS蒜氨酸(alliin,S•烯丙基厶半胱氨酸亚矶)，是大蒜中特有的含硫氨基酸，存在于大蒜鳞芽中，含量约0・5%~1・4%。1909年Rundquist从大蒜中首次分离得到，固体状态下稳定、无臭⑴。常温下蒜氨酸在蒜酶和水的作用下，迅速转化为大蒜辣素(allicin),并产生丙酮酸和氨。大蒜辣素是大蒜发收稿日期：2006-12.19.•通讯作者Tel/Fax：86・25・83271090.E・m・il:h・ngtj@cpu.edu.cn挥疗效的主要成分，但其在室温下很不稳定，迅速分解，难以分离提纯，需要-80*保存，无法直接开发成药物⑺。国内外药物学家均致力于从大蒜中分离纯化出蒜氨酸和蒜酶，分别制成适当制剂，在临用前混合，产生大蒜辣素，供临床使用。陈坚等2⑷已建立了蒜氨酸和蒜酶的分离纯化制备工艺。本研究采用HPLC-MS/MS对该工艺制备的蒜氨酸精制品中的有关物质进行了系统地分析鉴定。材料与方法药品与试剂精制蒜氨酸由新疆医科大学提供。脯氨酸、精氨酸、胱氨酸、门冬酰胺、谷氨酰胺对照品由江苏省药品检验所提供。甲醇为色谱纯，水为高纯水，其他试剂为分析纯。仪器美国Thermo-Finnigan公司TSQQuantumUltraAM型LC-MS/MS联用仪,XcaIibur1.1数据处理系统。色谱与质谱条件色谱条件色谱柱:PhenomenexNH2（4.6mmx250mm,5jim）;流动相：乙騰O4%甲酸（75：25）,流速：1.0mL・min-'；分流（7：3）MS检测；柱温：35乜；进样量为20jiL。质谱检测参数电喷雾正离子化•雾化气压:241.15kPa,辅助气压力:34.45kPa,毛细管温度：350总离子扫描（TIC）和二级质谱扫描（product）检测（Ar气CID.0.2Pa,能尿10eV）。样品的制备与HPLCMS/MS的检测称取梢制蒜...