Vol.33摇摇摇摇摇摇高等学校化学学报摇摇摇摇摇No.112012年11月CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES摇2457~2461月季花抗氧化活性成分研究王摇蕾,符摇玲,敬林林,阿有梅,贾摇陆(郑州大学药学院,郑州450001)摘要摇以活性追踪为指导分离和纯化了月季花中具有1,1鄄二苯基鄄2鄄三硝基苯肼(DPPH)自由基清除活性的成分.从月季花中分离得到了10个黄酮类化合物,采用光谱法对其结构进行了表征,并对它们的自由基清除活性进行了评价.结果表明,化合物1为新化合物,化合物1,2,4和9具有较强的清除DPPH自由基的活性.关键词摇月季;化学成分;槲皮素3鄄O鄄(2义,6义鄄二没食子酰基)鄄茁鄄D鄄葡萄糖苷摇O621.2摇摇摇摇文献标识码摇A摇摇摇摇doi:10.7503/cjcu20120335月季花(Rosachinensisflowers)是月季的干燥花蕾或初开放的花.中医认为月季味甘、淡、微苦,性温,入肝经,在活血调经、疏肝解郁及消肿解毒等方面有显著功效.月季的花、根和叶均可入药,具有抗菌、抗病毒、抗氧化、利尿、增强机体免疫力、抑制血小板聚集、抗癌和改善血糖等作用[1~3].现代营养学研究表明,月季花瓣富含蛋白质、糖类以及人体所需的全部必需氨基酸、多种维生素和矿物质,具有较高的营养保健价值[4,5].月季在我国分布广泛,资源丰富,对其活性物质进行系统的基础研究和深层次开发具有重要的经济价值和社会意义.本文采用1,1鄄二苯基鄄2鄄三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法对月季花不同极性溶剂萃取部分的抗氧化活性进行了研究,了解月季花中抗氧化成分的分布情况,并据此分离了月季花中高效的抗氧化活性化学成分,从月季花中分离得到10个黄酮类化合物,采用光谱法鉴定了它们的结构,并对其DPPH自由基清除活性进行了评价.结果表明,化合物1为新化合物,化合物1,4,8和9具有较强的清除DPPH自由基的活性.1摇实验部分1.1摇材料、试剂与仪器大花月季(红色)的花蕾于2009年5月采自河南南阳月季种植基地,经郑州大学药学院中药系潘成学副教授鉴定为蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(RosaL)植物月季(RosachinensisJacq.)的头状花序,标本存放于郑州大学药学院.薄层色谱用硅胶GF254和柱色谱用硅胶(青岛海洋化工厂);SephadexLH鄄20(GE公司);MCIgel(日本三菱公司);柱色谱用聚酰胺(100~200目,台州市路桥四甲生化塑料厂);石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇均为分析纯(天津市凯通化学试剂有限公司);1,1鄄二苯基鄄2鄄三硝基苯肼(DPPH·,Sigma公司);三羟甲基氨基甲烷(Tris,上海生物工程有限公司).UV1601型紫外分光光度计(日本岛津公司);DPX鄄400型超导核磁共振谱仪(瑞士Bruker公司);XT4A型显微熔点测定仪(北京科仪电光仪器厂).1.2摇月季花乙醇提取物各萃取部位的制备将干燥的月季花(2250g)粉碎,用体积分数为95%的乙醇(12倍量、8倍量及8倍量)分别加热回流提取3次,每次2h.合并滤液,用3层纱布过滤,于40益下减压浓缩,回收乙醇,得醇浸膏750g.用1500mL蒸馏水将醇浸膏分散,依次用等体积的石油醚(60~90益)、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇萃取,每种溶剂萃取3次.收集各部分萃取液,减压浓缩至小体积,转移到烧杯中,于水浴锅上蒸发溶剂收稿日期:2012鄄04鄄10.联系人简介:贾摇陆,男,博士,教授,主要从事天然药物化学研究.E鄄mail:jalujj@163郾com2458高等学校化学学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇Vol.33摇(70益).最终得到石油醚部分浸膏57g、氯仿部分浸膏20g、乙酸乙酯部分浸膏48g、正丁醇部分浸膏318g以及萃取后水溶性部分浸膏306g.1.3摇月季花乙醇提取物及各萃取部分清除DPPH·的活性测定1.3.1摇溶液的配制摇DPPH乙醇溶液的配制:称取8郾0mgDPPH,用无水乙醇溶解后转移至100mL容量瓶中,定容,摇匀,得到浓度为0郾2mmol/L的DPPH乙醇溶液,于4益下保存.Tris鄄HCl缓冲液(pH=7郾4,25益)的配制:称取1郾5gTris,用蒸馏水溶解,浓盐酸调节pH至7郾4,定容至250mL,得到浓度为50mmol/L的Tris鄄HCl缓冲液,于4益下保存.1.3.2摇样品溶液的配制摇取适量醇浸膏及各萃取部分的浸膏,于60益下真空干燥,粉碎,得到月季花乙醇提取物及不同极性萃取部分的待测样品,置于干燥器中保存,备用.精确称取上述干燥粉碎的各待测样品5郾0mg,分别用甲醇溶解并定容到25mL,得到浓度为0郾2mg/mL的母液.依次稀释成浓度分别为200,100,50,20和10滋g/...