T-spot.TB检测的临床研宄及应用进展徐一辛（常熟市中医院（新区医院）呼吸内科江苏常熟215500）【关键词】T-spotTB结核病综述【中图分类号】R319【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）06-0324-02据世界卫生组织统计结果，目前全球约有20亿人感染了结核分枝杆菌（MTB）,每年新感染患者约800〜1000万，因结核病死亡的患者约200〜300万［1］。结核病已是重要的全球公共卫生问题，严重危害人类健康。早期准确诊断结核病是控制疫情的重要手段之一。传统的诊断方法存在众多不足，如抗酸染色试验检出率低，MTB培养的时间讼，组织病理学检查为有创试验等。讼期以来，结核菌素试验一直是诊断MTB感染的重要方法，具有操作简便、成木低廉的优势，侶特异性及敏感性较低，其使用的结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）为200多种蛋白的混合物，多数与非MTB以及卡介苗（BCG）異有共同的抗原成分，易发生交叉反应，因此在BCG普遍接种的区域“假阳性”的比例较高。近年来T-spot.TB检测成为诊断结核病的新方法。木文就近年来该法的研究及应用作如下综述：l.T-spot.TB检测的原理及发展克隆的MTB基因组与BCG以及非MTB基因组的对比结果显示［2］，MTB所特有的片段即缺失区域（RD）仅在极少数的非MTB内发现，其表达的蛋白为MTB所特有，且未发现存在于BCG中，因此，接种BCG后不会发生免疫交叉反应；另外，研究表明［3］,近期暴露的抗原再次侵袭效应T细胞后，会释放γ干扰素，故对某一抗原的效应T细胞进行体外检测，可有效判断体内近期抗原暴露状态。用来检测抗原特异性T细胞的技术一一“酶联免疫斑点技术（ELISPOT技术）能够检测出1/100000至1/50000的外周血单核细胞（PBMCs）中经抗原刺激后释放细胞因子的细胞，目前己成为最敏感的检测方法之一［4］。随着基因分子生物学及免疫学的发展，应用ELISP0T技术进行的T-spot.TB检测应运而生。机体受到MTB感染后，引发固有免疫和获得性免疫，由于机体内长期存在特异性的中央型以及效应型记忆细胞，当抗原再次刺激机体吋，这些记忆细胞可迅速活化增殖，并释放γ干扰素［5］。因此，T-spot.TB检测是通过ELISP0T技术对经结核RD1区编码抗原ESAT-6以及CFP-10肽段库刺激后释放γ干扰素进行检测的方法［6】。该法于2004年在欧洲、英国上市，加拿大于2005年批准使用，而2008年美国FDA的审批完成。2.T-spot.TB的临床意义2.1外周血中T-spot.TB检测在活动性结核病中的诊断意义2.1.1敏感性高于结核菌素试验：Pai等［7］对13项研究进行了meta分析，726例患者中绝大部分为MTB培养阳性，结果T-spot.TB检测的综合敏感性达90%oLalvani等［8］首先将痰培养MTB阳性的结核病患者47例分别进行T-spot.TB检测，结果T-spot.TB阳性者45例，阳性率高达96%，接着将苏中26例患者进行T-spot.TB和结核菌素试验，结果T-spot.TB阳性率显著高于结核菌素试验(92%vs.69%)。说明T-spot.TB检测对活动性结核病灵敏度高于结核菌素试验。2.1.2对免疫抑制人群结核病诊断的意义：T-spot.TB检测在免疫力低下的结核病患者中依然显示较高的敏感性。Chapman等［9］对HIV阳性的结核病患者39例进行T-spot.TB检测，结果敏感性为90%，显著高于结核菌素试验(72%)。Richeldi等［10］对免疫功能低下的肝移植患者、HIV感染者以及恶性血液病患者的研究，以及Chung等［11］对血液透析患者的相关研究，均得出冋样的结论，即T-spot.TB检测具有较高的敏感性，且高于结核菌素试验，可更准确地检测潜伏期结核菌感染。Piana等［12］将与痰培养MTB阳性患者接触过的免疫抑制患者129例进行T-spot.TB检测以及结核菌素试验，结果T-spot.TB阳性率为44.2%,显著高于结核菌素试验(17.4%);进一步统计分析结果显示，T-spot.TB阳性率在外周血白细胞汁数正常与减少或增多的患者中无显著差异(44.6%vs.44.3%)，而结核菌素试验阳性率在以上2种情况下差异明显(25.9%vs.14.5%)。说明T-spot.TB检测在免疫抑制患者结核感染的诊断中，仍具奋较高的敏感性，£L优于结核菌素试验。2.1.3在肺外结核诊断中的意义：由于肺外结核病变部位多变，症状不典型，相对于肺结核诊断难度更大，而T-spot.TB检测对肺外结核具奋较高的敏感性。Kim等［13】...