化瘀祛斑胶囊提取工艺研究【摘耍】目的:确定化瘀祛斑胶囊最佳提取工艺方法。方法：采用正交试验方法，以黄苓昔含量为检测指标，以水提醇沉为提取制备方法，考察各因素的影响。结果最佳工艺如下：加入的水量为10倍，提取次数为3次，提取时间为1ho合并滤液，浓缩至浓度为l.lg/mL-1,加乙醇使含醇量为60%沉淀，静置18ho结论该法提取效率高，稳足性好。【关键词】化瘀祛斑胶囊；正交试验；黄苓昔；提取T艺【中国分类号】R461［文献标识码】A【文章编号】1044-5511(2011)11-0078-01化瘀祛斑胶囊是由柴胡、薄荷、黄苓、当归、红花、赤芍6味药物制成，功效为疏风清热，活血化瘀，用于黄褐斑、酒渣、粉刺。收载于《卫生部夯品标准》中药成方制剂第19册。方中柴胡、薄荷、当归为粉碎料,其余三味药材红花、赤芍、黄苓选择水提醇沉法为提取方法。本文以黄苓昔的提取量为考察指标，采用正交试验法对化瘀祛斑胶囊的提取工艺条件进行比较优化。1仪器和试药口本岛津高效液相色谱仪：LC一lOATvp泵、SPD-lOAvp检测器；浙江大学智能信息公司N—2000双通道色谱工作站；H54AR1型十万分之一电子天平；药材饮片（购于邢台市恒祥大药房），所用化学试剂均为分析纯。黄苓甘标准品购自中国药品生物制品检定所（批号110715-200714,供含量测定用）。2方法和结果[1,3]2.1水提工艺的优选2.1.1水提因素水平（表1）采用正交试验法对其主要影响因素加水量（A）、提取次数（B）、冋流提取时间（C）进行考察。每付药提取后定容至125mLo以黄苓苗的提取量为考察指标，采用三因素三水平正交法确定其提取条件。2.1.2黄苓昔的含量测定:色谱条件：色谱柱:DiamonsilTMC185um（200mmX4.6mm）色谱柱;流动相:乙臆一甲醇一0・2M磷酸缓冲盐⑵:10：69）；流速：1.OmL/min；柱温：30°C；检测波长：280nm；理论板数：按黄苓廿峰计算不得低于2000o注：0.2M磷酸缓冲盐溶液配制方法：取31.2g磷酸二氢钠加水至lOOOmL,加入磷酸13mL即得。対照品溶液的制备：精密称取黄苓甘対照品10.4mg,置lOniL容量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，溶解、摇匀即得（每lniL中含黄苓昔1.04mg）0供试品溶液的制备：提取液真空烘干至恒重，取样品约3g,精密称定,置具塞锥形瓶中，加稀乙醇50niL密塞，称定重量，超声处理30min,放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。标准曲线的制定精密吸取对照品溶液（1.05692mg/mL-l）l,2,3,4,5,6uL,注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，记录峰面积，结果为Y二998.76X+24,r=0.9998；线性范围:lug~6ug0各提取液中黄苓苛的含量测定：精密吸取各供试品溶液10uL,以“标准曲线的制定”项下操作并测定吸收峰面积，计算含量。对结果进行方差分析。各因素对化瘀祛斑胶囊水提工艺中黄苓昔含量的影响大小顺序是：提取次数＞加水量〉提取时间。表3方差分析结果表明，A因素（加水量）和C因素（提取时间）对结果影响不人，B因素（提取次数）对结果有显著性影响。根据正交试验结果，6号试验结果提取黄苓昔含量最多即加入的水量为10倍，提取次数为3次。提取时间为1h0故采取此提取方法。2.1.3验证试验:取3份药材，按上述优选的试验结果即加入的水量为10倍，提取次数为3次，提取时间为1h；浓缩至浓度为1.1mg/mL-lo测定结果见表4,可见该工艺条件稳定，重复性好。2.2醇沉工艺的优选〃为除去杂质并最大限度的保留有效成分，以黄苓昔含量为指标，对影响醇沉的因素（药液浓度、含醇量、静置时间）进行考察。以最佳水煎工艺置备一定量的药液并平分9分。按正交试验进行•含量测定方法同上，醇沉因素水平详见表2,结果醇沉最佳工艺为药液浓度为1.1mg/niL-1,乙醇浓度为60%,静置时间为18h。由于三个因素对其结果均无显著性影响，从节约能源角度考虑将制备丁艺确定为浓缩至浓度为1.1mg/mL-1,加乙醇使含醇量为60%进行沉淀。静置18h。表2醇沉因素水平表2.3验证试验:取3份药材，按上述优选的试验结果即加入的水量为10倍,提取次数为3次,提取时间为1h；浓缩至浓度为1.1mg/mL-1,加乙醇使含醇量为60%沉淀，静置18h进行提取。结果可见该工艺条件稳定，重复性好。3讨论3.1在水提过程中黄苓苻为方中主要成分且比较稳定，所...