感清糖浆HPLC特征指纹图谱研究凯里学院，贵州凯里556000;贵州百灵企业集团制药股份有限公司，55000摘要目的：建立感清糖浆的HPLC特征指纹图谱分析方法，为全面的质量评价提供依据。方法:釆用HPLC法，色谱柱为DiamonsilC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；以乙腈-0.1%磷酸水溶液作为流动相，梯度洗脱：0〜30min,10%〜20%乙腈；30〜50min,20%~25%乙腈；50〜80min,25%〜35%乙腈；80〜120min,35%〜85%乙腈;体积流量1.0mL/min;检测波长282nm;进样量10μl。结果:采用《中药色谱特征图谱相似度评价系统2012版》进行分析，建立了感清糖浆HPLC特征指纹图谱的共有模式，指认了芦丁、石吊兰素、金丝桃苷、没食子酸4个特征峰。结论：首次建立了感清糖浆的HPLC对照特征指纹图谱，该方法简单、快速，重复性好，对感清糖浆的整体质量提出了更高的要求，为质量控制和评价标准提供充分的依据。关键词：感清糖浆；高效液相色谱法；特征指纹图谱；芦丁；石吊兰素；金丝桃苷没食子酸【中图分类号】R365【文献标识码】A【文章编号】1001-5213（2016）09-0365-02应用色谱特征谱控制中药复方制剂的质量，是中药复方制剂走向国际的前提条件［1］。因此，木实验首次建立了感清糖浆的特征指纹图谱方法，初步确定共有峰的归属，保证临床用药的安全有效性。1仪器与试药AgilentTechnologies1200series高效液相色谱仪；HS10260D型超声波清洗仪；YHG.600-BS-II型远红外鼓风干燥箱；RE-52A型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）;色谱柱（AlltimaTMC18、DiamonsilC18）；DiamonsilC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）。石吊兰素（批号：111555-200602,含量测定用）；没食子酸（批号：110831-200803,含量测定用）芦丁（批号：100080-200707,含量测定用）金丝桃苷（批号：111521-201205,含量测定用）。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱为DiamonsilC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）;流动相：乙晴-0.1%磷酸水，梯度洗脱，洗脱程序为0〜30min,10%〜20%乙腈;30〜50min,20%〜25%乙腈；50〜80min，25%〜35%乙腈；80〜120min,35%〜85%乙腈；检测波长282nm；流速1.0mL?min-l,进样量10μL；洗脱吋间为120min。2.2对照品溶液的制备取芦丁，没食子酸，石吊兰素，金丝桃苷各约0.2mg，精密称定，置5mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。2.3供试品溶液的制备精密量取感清糖浆10ml,加硅藻土5g,拌匀，在60°C烘干，放冷，研细，精密加入100mL甲醇，称定重量，超声处理（功率250W,频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml,蒸干，残渣加水25ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次25ml,合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.4方法学考察2.4.1测定吋间的确定精密吸取感清糖浆供试品溶液10μl,注入高效液相色谱仪。，按“2.1”项下色谱条件进行测定，色谱峰显示，保留吋间120min后，无色谱峰，故将吋间确定120min。2.4.2精密度试验取批号20140902样品，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行测定，连续进样5次，记录特征图谱。将色谱数据导m*.cdf格式文件，并将数据导入国家药典委员会2012年颁布的《中药色谱特征图谱相似度评价系统A版》进行评价（下同），计算得该5次特征图谱的相似度高于0.99，各共冇色谱峰相对保留吋间的RSD均小于0.09%,相对峰面积的RSD均小于0.72%,说明仪器精密度良好。2.4.3稳定性试验取同一批(20140902)供试品溶液，分别在2h、4h、6h、8h、12h、24h、36h、48h进行测定，记录特征图谱。计算得48h内8次进样所得的特征图谱的相似度高于0.98,各色谱峰相对保留吋间的RSD均小于0.08%,相对峰面积的RSD均小于0.64%,表明供试品在48h内较稳定。2.4.4重复性试验取取批号20140902样品，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液5份,按“2.1”项下色谱条件进行测定，各进一针，记录特征图谱。计算得5份供试品特征图谱的相似度均高于0.99，各色谱峰相对保留吋间的RSD均小于0.06%，相对峰面积的RSD均小于1.10%,表明该方法重现性良好。2.5感清糖浆特...