HPLC法测定果汁中糖精钠含量的不确定度分析李玉萍（江门市新会区疾病预防控制中心广东江门529100）【摘要】目的规范HPLC法测定果汁糖精钠含量的不确定度分析程序，使不确定度评定合理。方法调节仪器最佳测定条件，测定果汁糖精钠溶液标准系列建立工作曲线，并连续测量6次样品，获得未知样品糖精钠浓度，依据分析仪运用工作软件自动建立工作曲线，读出被测样品浓度原理建立数学模型，分析HPLC法测定果汁糖精钠含量的误差性质和来源,确定不确定度的主要因素，计算糖精钠的测量不确定度。结果木法测定果汁中糖精钠含量为0.198g/Kg,扩展不确定度U95=0.00507g/Kg（&nU;eff=8）。结论根据分析仪器的测定数据输出方式建立数学模型，进行不确定度评定，方法直观简明，与实际工作相符合。【关键词】HPLC糖精钠测量不确定度果汁【中图分类号】R155.5【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2012）15-0304-02在实际仪器分析工作中，现代分析仪运用工作软件，自动建立工作曲线读出被测样品浓度,木文据此原理建立数学模型［1］,进行了HPLC法测定果汁中糖精钠的不确定度分析［2、3］，现报告如下。1材料与方法1.1主要仪器与试剂岛津CLASS-VP液相色谱仪，紫外检测器，C18色谱柱，超声波清洗器，甲醇（色谱纯）。1.2色谱条件色谱柱：C18色谱柱，250mm×4.6mm流动相：甲醇（色谱纯）+乙酸铵溶液=13+87流速：l.Oml/min检测波K::230nm进样量:20ul1.3标准物质标准液用1.00±lmg/mL的糖精钠标样(中计量科学研究所)。1.4测量方法简述1.4.1称取5.000g样品，加入1+1氨水50ul摇匀，用水定容至50ml◊移入离心管中4000r/min离心5min,吸取上清液用微孔滤膜过滤。1.4.2工作曲线：取5、10、25、50、100ul加纯水到1.00ml,含量分别为5、10、25、50、100ug/mLo1.4.3滤液与标准系列各20ul注入色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留吋间为依据定性，以其峰面积求出样品中糖精钠含量。2测量数学模型由公式：导出：u2rel(x)=u2rel(I)+u2rel(C标)+u2rel(vl)+u2rel(m)+u2rel(A样)4不确定度的分量计算4.1线性拟合引起的不确定度分量u(l)4.1.1标准曲线数据见表1表1序号糖精钠标准液测定的数据及分析xl-x-峰面积标准溶液(ug/mL)y0(y0-y-)215-33.00335061320456213306025210-28.0059205959700124423364325-13.0014279961426636184960045012.00冋归方程y=55309x+43911，r=l,x-=38.00,n=5,回归直线的标准偏差SR自由度νl=5-2=34.2标准物质的标准不确定度分量u(c标)标准物质来自国家标准物质研宄中心，糖精钠标样浓度值为1.00±lmg/mL，取置信水准95%，k=2,贝有:u(c标｝=1/2=0.5(ug/mL)urel(C标)=[u(c标)/c标]=0.5/100.0=0.5×10-2u2rel(C标)=(0.5×10-2)2=0.25×10-4自由度：ν2=∞4.3容量体积的不确定度分量u(vl)4.3.150ml容量瓶的最大允差为±0.02ml，即半宽度为±0.02ml,属均匀分布，则容量瓶的标准不确定度为：u(v50)=0.02/=0.01155(ml)urel(v50)=u(v50)/v50=0.01155/50=2.31×10-4u2rel(v50)=(2.31×10-4)2=5.34×10-84.3.2100ml容量瓶的最大允差为0.1ml,即半宽度为0.1ml，属均匀分布，则容量瓶的标准不确定度为：u(vlOO)=0.1/=0.058(ml)urel(vlOO)=u(vl00)/vl00=0.058/100=5.8×10-4u2rel(vlOO)=(5.8×10-4)2=3.36×10-727885032809361510055847055574811平均38.0013505616462.00978912364.3.310ml移液管体积的最人允差为0.02ml,即半宽度为0.02ml,属均匀分布，则容量瓶的标准不确定度为：u(vlO)=0.02/=0.01155(ml)urel(vlO)=u(vl0)/vl0=0.01155/10=1.15×10-3u2rel(vlO)=(1.15×10-3)2=1.32×10-64.3.4容量体积的不确定度分量u(vl)u2rel(vl)=u2rel(v50)+u2rel(vlOO)+u2rel(vlO)=(5.34×10-8+3.36×10-7+1.32×10-6)=2.92×10-6按最大允差所评定出的不确定度是可靠的，其自由度：ν3=&infin；o4.4称量的标准不确定度分量u(m)4.4.1天平的标准不确定度分量u(ml)天平的允差为100.00±0.01g,即半宽度为±0.01g,按均匀分布，属B类，则天平的标准不确定度为：u(ml)=0.01/=0.00577(g)urel(m...