过氧化苯甲酰对大鼠肝毒性的研究李伟1李慧鑫2赵全年1宋卫东1(通讯作者)(1内蒙古医科大学附属人民医院内蒙古呼和浩特010020)(2内蒙古第三医院内蒙古呼和浩特010020)【摘要】目的研究过氧化苯甲酰摄入量与肝脏毒性作用关系。方法以wistar大鼠为研究对象,分组灌胃,连续8周。检测血清总胆红素仃BIL),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),测定肝组织中丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)o做病理组织学检查。结果与对照组相比,各实验组肝组织中SOD活力下降。大剂量组大鼠的血清中TBIL,ALT,AST,ALP,肝组织中MDA量增高。病理学检查可见各实验组肝脏炎性表现。结论长期摄入过氧化苯甲酰对大鼠肝脏存在毒性作用。随剂量增加,毒性增加。【关键词】过氧化苯甲酰大鼠肝毒性剂量■毒性【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)07-0102-01前言近年来,人们认识到食晶安全问题,己经成为影响健康的一个重大因素。食品添加剂的使用泛滥,成为一些外科临床疾病的新的病因。过氧化苯甲酰是以往在面粉中普遍使用的食品添加剂。它主要是用来漂白面粉⑴。这是一种极具争议的面粉添加剂。欧盟早己禁用美国却可不限量使用。我国先前规定过氧化苯甲酰在面粉中使用量在60mg/kg⑵但国内尚未见专门研究过氧化苯甲酰毒性的报道。为进一步明确其肝毒性。木实验就过氧化苯甲酰摄入量与肝脏毒性作用关系,做了初步研究。1实验材料1.1试验动物wistar大鼠40只,雌雄各半,清洁级,购于内蒙古大学实验动物中心,许可证号:SCXK(蒙)2002—0001o1.2药物过氧化苯甲酰批号:20090503,郑州天通食品配料有限公司生产。1.3试剂总胆红素(TB)试剂盒批号:2009055,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒批号:2009005,丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒批号:2009037,天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒批号:2009034,丙二醛(MDA)试剂盒批号:2009003,超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒批号:2009001,以上试剂均由长春汇力生物技术有限公司生产。1.4仪器JJ2000型精密电子天平,上海精密实验仪器有限公司;FA1004电子分析天平,上海良平仪器仪表有限公司;全自动生化分析仪OLYMPUS光学株式会社;722分光光度计,上海精密实验仪器有限公司。2实验方法2.1实验中动物随机分成四组:①对照组,②过氧化苯甲酰60mg/kg体重组,③过氧化苯甲酰120mg/kg体垂组,④过氧化苯甲酰240mg/kg体重组,每组10只。2.2每天上午按相应剂量灌胃给药1次,对照组给予洁净自来水,并观察动物的一般状况,连续8周。2.3禁食12h后,称动物体重用10%水合氯醛腹腔注射0.3ml/100g体重麻醉大鼠。腹主动脉取血5ml分离血清,检测血清ALT,AST,TBIL,ALPo2.4在相同肝小叶上取一-块肝组织用福尔马林液固定,常规石蜡包埋、切片,H.E.染色,光镜下做病理组织学检查。2.5另取0・2g肝组织用生理盐水制成10%的肝匀浆2ml,用TBA比色法测定肝组织中MDA[3],将10%肝匀浆用生理盐水稀释成1%,用黄瞟吟氧化酶法测定肝组织中S0D[4]o2.6统计方法所有数据用x±s表示。使用spssl3.0统计软件进行处理。过氧化苯甲酰各组与对照组之间比较使用t检验。3实验结果3.1对大鼠血清中AST,ALT,ALP的影响过氧化苯甲酰240mg/kg组和120mg/kg组血清中AST,ALT,ALP与对照组比较明显增高。过氧化苯甲酰60mg/kg组大鼠情况与对照组无显著差异。结果见表2。表2过氧化苯甲酰对血清中TBIL,ALT,AST和ALP的影响(x■±s)与对照比较△PVO.Ol,AP<O.O53.2对大鼠肝组织中SOD和MDA的影响过氧化苯甲酰240mg/kg组和120mg/kg组MDA水平均明显高于对照组。各剂量组与对照组之间SOD的活力比较,均出现明显下降。结果见表2。表2过氧化苯甲酰对肝组织中MDA和SOD的影响(x±s)与对照比较△PVO.Ol,AP<0.053.3肝脏病理组织学检查结果光镜下观察,对照组正常。过氧化苯甲酰60mg/kg组肝血窦均轻微扩张,充血,其中个别可见肝细胞水样变性ol20mg/kg组肝血窦轻微扩张,充血,个别标本小灶炎细胞散在浸润。过氧化苯甲酰240mg/kg组均见肝细胞全部水样变性。4讨论过氧化苯甲酰240mg/kg组和120mg/kg组均能导致血清中TBIL,ALT,AST和ALP明显升高。ALT等是检验肝损伤的敏感指标[5],可见超出原定量的摄入用过氧...