细辛脂素联合受体脾细胞诱导心脏移植免疫耐受的研究

细辛脂素联合受体脾细胞诱导心脏移植免疫耐受的研宄【摘要】目的:本实验通过术前7日和术前3曰输注不同剂量供者脾细胞于受体胸腺内,联合中药细辛中的细辛脂素成分,探讨其对心脏移植免疫耐受的诱导,并对诱导效果加以比较。方法:提取中药细辛中的细辛脂素成分。健康雄性Wistar大鼠(供体)和SD大鼠(受体)各80只随机配对,建立大鼠腹部异位心脏移植模型,将接受心脏移植的SD大鼠分成5组:A组:阳性对照组,行腹部异位心脏移植,不给任何处置;B组:细辛脂素组:行腹部异位心脏移植,术前7天开始灌服细辛脂素25mg?kg-l?d-l;C组:脾细胞诱导组1,术前7天开始输注供者脾细胞于受体胸腺内;D组:脾细胞诱导组2,术前7天开始输注供者脾细胞于受体胸腺内,术前7天开始灌服细辛脂素25mg?kg-l?d-l;E组:脾细胞诱导组3,术前3天开始输注供者脾细胞于受体胸腺内,术前7天开始灌服细辛脂素25mg?kg-l?d-l。每组各8只术后第7天处死。另外8只用于观察移植物生存天数。噻哇蓝(MTT)法检测供受体混合淋巴细胞反应;应用ELISA法检测受体血清中IL-2、IFN-y、IL-4和IL-10水平;结果:1、免疫诱导组联合细辛脂素组(D组和F组)移植心存活时间较阳性对照组显著延长(P【关键词】细辛脂素;心脏移植;脾细胞;细胞因子;免疫耐受【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】1008-6455(2011)12-0019-02TheInductionofImmuneToleranceinRatsCardiacAllograftbyAsarininCombinedwithsplenocyteZhangLiliWangXiaoyunChenYanjunletal.[AbstractlObjective:Tostudytheeffectofimmunetoleranceinratscardiacallograftinducedbydonorsplenocyte7daysandldaybeforeoperationcombinedwithAsarinin.Methods:Toextracttheasarininfromherbaasari.The80SDrats(receptor)and64wistarrats(donor)weredividedintofivegroups:groupA(controlgroup);groupB(Asarinintreated7daysbeforeoperation);groupC(splenocytetreated7daysbeforeoperation);groupD(splenocytetreated7daysbeforeoperationandAsarinin);groupE(splenocytetreated3daysbeforeoperationandAsarinin).Someweretoexaminesurvivaltime(n8)andothersweretoobservemixedlymphocytereaction(MLR)betweenthedonorandreceptorwithMTT;thelevelofIL-2,IFN-yJL-4andIL-10inserumwithELISApostoperatively7days(n8).Result:1.AllograftssurvivaltimeisprolongedingroupDandE(PHl3:取产自黑龙江的中药材辽细辛,购自黑龙江省中药联营公司,鉴定师黑龙江省中医药大学王栋教授。采用常用的方法提取中药细辛中的细辛脂素成分,经鉴定细辛脂素纯度达95%以上,将提取的细辛脂素与橄榄油以500mg/100ml比例配成悬浊液。1.2大鼠腹部异位心脏移动物模型和免疫耐受诱导模型制备1.2.1实验动物:受体大鼠健康雄性SD系大鼠,体重200—250g,供体大鼠健康雄性Wistar系大鼠,体重150—200g。由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供。采用大鼠的同种异体腹部异位心脏移植术。供、受体均为无菌手术。供心的主动脉和肺动脉分别与受体的腹主动脉和下腔静行端個I]吻合。1.2.2主要试剂和试剂盒:高钾停跳液:哈医大二院心外科提供。供心保存平衡液:林格氏液。CsA:新山地明(瑞士山德士药厂生产)生理盐水稀释成lmg/ml,4°C保存备用。噻哇蓝(MTT):购自美国Sigma公司。试剂盒:IL-2、IFN-丫、IL-4和IL-10EUSA检测试剂盒购自深圳晶美公司。按试剂盒说明操作。1.2.3供体脾细胞悬液的制备方法:取Wistar大鼠80只,与SD大鼠80只随机配对。移植前7天,Wistar大鼠用1%戊巴比妥钠按40mg/kg腹腔注射麻醉后,小心推幵肠管,无菌切除脾脏。然后将脾脏置于放有冰块的平皿内,去掉被膜,将脾脏剪碎成匀浆状,剪碎后的脾组织匀浆用Tris-NH4CI溶解红细胞,再用Hanks液洗涤3次,200目钢网过滤,制成脾细胞悬液。用RPMI1640液调细胞浓度为2.5X107ml-l。台盼兰拒染法判断细胞活性大于95%。37°C5%CO2条件下培养。移植前7天,取配对SD大鼠,用1%戊巴比妥钠按40mg/kg腹腔注射麻醉,颈胸部纵切口,显露胸腺,用微量进样器(针头直径0.32mm)将供者特异性抗原细胞一次性均匀注入配对C组和D组受体SD大鼠的胸腺两侧...

1、当您付费下载文档后,您只拥有了使用权限,并不意味着购买了版权,文档只能用于自身使用,不得用于其他商业用途(如 [转卖]进行直接盈利或[编辑后售卖]进行间接盈利)。
2、本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供参考,付费前请自行鉴别。
3、如文档内容存在侵犯商业秘密、侵犯著作权等,请点击“举报”。

常见问题具体如下:

1、问:已经付过费的文档可以多次下载吗?

      答:可以。登陆您已经付过费的账号,付过费的文档可以免费进行多次下载。

2、问:已经付过费的文档不知下载到什么地方去了?

     答:电脑端-浏览器下载列表里可以找到;手机端-文件管理或下载里可以找到。

            如以上两种方式都没有找到,请提供您的交易单号或截图及接收文档的邮箱等有效信息,发送到客服邮箱,客服经核实后,会将您已经付过费的文档即时发到您邮箱。

注:微信交易号是以“420000”开头的28位数字;

       支付宝交易号是以“2024XXXX”交易日期开头的28位数字。

客服邮箱:

biganzikefu@outlook.com

所有的文档都被视为“模板”,用于写作参考,下载前须认真查看,确认无误后再购买;

文档大部份都是可以预览的,笔杆子文库无法对文档的真实性、完整性、准确性以及专业性等问题提供审核和保证,请慎重购买;

文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为依据;

如果您还有什么不清楚的或需要我们协助,可以联系客服邮箱:

biganzikefu@outlook.com

常见问题具体如下:

1、问:已经付过费的文档可以多次下载吗?

      答:可以。登陆您已经付过费的账号,付过费的文档可以免费进行多次下载。

2、问:已经付过费的文档不知下载到什么地方去了?

     答:电脑端-浏览器下载列表里可以找到;手机端-文件管理或下载里可以找到。

            如以上两种方式都没有找到,请提供您的交易单号或截图及接收文档的邮箱等有效信息,发送到客服邮箱,客服经核实后,会将您已经付过费的文档即时发到您邮箱。

注:微信交易号是以“420000”开头的28位数字;

       支付宝交易号是以“2024XXXX”交易日期开头的28位数字。

文秘专家
机构认证
内容提供者

1

确认删除?