不同品种枳实HPLC指纹图谱及成分含量差异性研究［摘要］采用HPLC-DAD方法建立18个批次酸橙枳实以及10个批次甜橙枳实的指纹图谱，通过对照品对照和紫外图谱指认了17个色谱峰并对其进行含量测定。色谱条件:AgilentPoroshell120SB-C18色谱柱(4.6mmXlOOmm,2.7um),以流动相甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱，流速0.6mL・min-1,检测波长318nm,柱温为30°C。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)软件进行指纹图谱分析，进一步通过SIMCA-P13.0软件对17个确认的成分含量进行最小二乘法判别分析，确定区分酸橙枳实与甜橙枳实的差异性标记物。该方法具有良好的精密度、稳定性和重复性，为枳实的质量控制和评价提供依据。［关键词］HPLC-DAD；酸橙枳实；甜橙枳实；指纹图谱；含量测定；差异性标记物[Abstract]ThisstudyistoestablishanHPLCfingerprintbyHPLC-DADmethodandsimuItaneousquantitativeanalysisof17componentsof18ba/tchesofCitrusaurantiumand10batchesofC・sinensis・TheseparationwasperformedonanAgilentPoroshell120SB-C18(4.6mmX100mm,2.7um)columnwiththegradientelutionofmethano1一0・1%formicacidwater,theflowwas0.6mL•min-l.Thedetectionwavelengthwassetat318nm.Thecolumntemperaturewasmaintainedat30°C・ThedatacalculationwasperformedwithsimilarityevaluationsystemforchromatographicfingerprintoftraditionalChinesemedicine(Version2004A)togetherwithSIMCA-P13.0softwaretoclarifythedifferentialmarkerbetweenthesetwodifferentspeciesofAurantiiFructusImmaturus・ThismethodhasgoodprecisionstabilityandrepeatabilitythatcouldprovidebasisforqualitycontrolandevaluationofAurantiiFructusImmaturus・[Keywords]HPLC-DAD；Citrusaurantium；Citrussinensis；fingerprint；quantitativeanalysis；differentialmarkerdoi：10.4268/cjcmm20161725枳实为常用中药，应用历史悠久，始载于《神农本草经》,为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种或甜橙C.sinensisOsbeck的干燥幼果。5—6月收集自落的果实，除去杂质，自中部横切为两半，晒干或低温干燥，较小者直接晒干或低温干燥。具有破气消积，化痰除痞的功效［1］。目前枳实的产地主要有江西、四川、重庆、湖南、湖北、浙江、江苏、贵州等。其中以江西为传统道地产地，四川质量优，湖南产量大［2］。酸橙的变种主要有黄皮酸橙C.aurantium'Huangpif、代代花C・aurantiumfDaidair、朱栾C・aurantium'Chuluan,和塘橙C.aurantium'Tangcheng7。枳实中主要含有黄酮类成分、生物碱成分、挥发油成分和香豆素类成分，具有抗氧化、抗过敏、抗炎、抗肿瘤、升压、强心、促进胃肠功能等作用［3-9］o酸橙与甜橙均作为枳实药用，前期研究发现它们的挥发油成分和主要4种黄酮类成分存在差异［10-11］,2种枳实组成的枳术丸临床疗效［12］也有所不同。中药指纹图谱采用现代化的分析手段,得到能够标识中药材或制剂的特征成分的光谱图或色谱图，结合现代数理统计软件可将多维信息进行分析处理，使得指纹图谱信息得以充分整合、正确表达，真实、形象地反映了中药质量的差异［13］。枳实品种来源各异，产地不一，市场流通的枳实药材多不知来源。2015年版《中国药典》规定，以辛弗林作为枳实质量控制的指标［1］,为更全面反映枳实内在化学成分的种类和数量，以分析不同品种枳实质量差异，从而控制枳实的内在质量，本文以酸橙枳实和甜橙枳实为研究对象，在建立了不同品种枳实HPLC指纹图谱的同时，对其中17个含量较高的活性成分（7-0H香豆素，芸香柚皮昔，柚皮昔，橙皮昔，新橙皮昔，芹菜昔，野漆树昔，山奈昔,柚皮素，橙皮素，芹菜素，香叶木素，甜橙黄酮，川陈皮素，5-去甲川陈皮素，橘皮素，橙皮油素）进行标定并测定含量，确定了区分酸橙枳实与甜橙枳实的差异性标记物，为枳实多成分多指标测定及整体质量评价提供参考，也为枳实质量标准的提高提供AgilentHP1100系列液相色谱仪，配备G1322A脱气机,G1311A四元泵,G1316A恒温箱,G1315BDAD检测器,G1313A自动进样器，ChemStation色谱工作站；TCQ-250型超声波清洗器（北京医疗...