HLA-DR基因与南方汉族2型糖尿病合并肺结核的相关性分析王大江舒维宗佩兰（江西省胸科医院330000）【屮图分类号】R587.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）28-0033-03【摘要】A的探讨人类Q细胞抗原（HLA）-DR棊因与屮国南方汉族部分人群2型糖尿病合并肺结核的相关性；寻找与南方汉族2型糖尿病合并肺结核可能相关的HLA基因。方法采用病例对照和应用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）方法对南方汉族120例2型糖鉍病合并肺结核患者和与其无血缘关系的70例健康对照组以及70例单纯2型糖尿病患者分别进行HLA-DR等位基因的分型，比较其等位基因频率（GF）并计算其比值比（OR）。结果（1）南方汉族2型糖尿病合并肺结核病例组屮的DR4等位棊因的棊因频率显著高于健康对照组，两组的GF值分别为25.35%、14.56%,两者之间差异具有显著性（x2=4.67,Pc<0.05,RR值为2.32）。（2）南方汉族2型糖尿病合并肺结核病例组屮的DR4等位基因的棊因频率也显著高于单纯2型糖鉍病患者组，分别为25.35%、8.36%,两者之间差异具有显著性（x2=7.87,Pc<0.05,RR值为3.26）。（3）南方汉族2型糖尿病合并肺结核病例组屮的DR1等位基因的基因频率显著低于健康对照组，分别为6.95%、11.38%,两者之间差异具有显著性（x2=9.22,Pc值<0.01,RR值为0.33）。（4）南方汉族2型糖尿病合并肺结核病例组屮的DR1等位基因的基因频率也显著低于单纯2型糖尿病患者组，分别为6.95%、21.67%，Pc值<0.01,RR值0.28）。结论（1）DR4等位基因与南方汉族部分人群的2型糖鉍病合并肺结核发病可能密切相关，或是真正起作用的基因与它们连锁。（2）DR1基因可能是南方汉族2型糖尿病合并肺结核的保护基因。【关键词】结核肺糖鉍病基因HLA-DR聚合酶链反应2型糖尿病和肺结核是两种严重危害人类健康的全球性疾病。糖尿病与结核病的免疫均与细胞免疫有关，细胞免疫又与HLA相关，我们采用病例对照和应用聚合酶链反应-序列特异性引物方法对南方汉族2型糖尿病合并肺结核患者HLA-DR基因基因位点进行研宄。一、材料和方法（一）研宄对象1.病例组：江西省胸科医院收治确诊在中国南方生活3代以上的汉族2型糖尿病合并肺结核患者（无哮喘、高血压、肺癌及慢性阻塞性肺疾病等其他合并症）共计120例，男性70例，女性50例，年龄50-78岁，平均65岁。2.对照组:A组70例与病例组无血缘关系且生活环境相近的南方汉族单纯2型糖尿病患者，其中男性40例，女性30例，年龄45-75岁，平均年龄58岁；B组为70例同条件的南方汉族健康志愿者，其中男性38例，女性32例，年龄49-76岁，平均63岁。（二）实验材料1.主要试剂：TaqDNA聚合酶（美国PE公司生产），蛋白酶K（德国MerK公司生产，血白细胞DNA快速提取试剂盒（德国QIAGEN公司生产），KLA-DRB基因SSP方法分型试剂盒（德国Biotest）公司生产）。以上均由北京诺诗生物技术有限公司提供。2.主要仪器：美国Mj公司生产的PTC-100型DNA扩增仪：DNA检测紫外投射仪。（三）实验方法1.病例组患者及对照组A组进行血糖（空腹及餐后2小吋血糖），糖化血红蛋白，C肽，胰岛素及胰岛素抗体进行检测。2.外周血白细胞基因组DNA的提取：按QIAGENDNA快速提取试剂盒说明书进行操作。3.DNA纯度测定：用紫外分光光度计测定纯度，DNA纯度不合格则重新提取。4.DNA扩增与HLA-DR基因座DRB座位的HLA-DRB1、DRB3、DRB4、DRB5等位基因进行分型：应用德国Bioteest生产的PCR-SSPHLA基因分型试剂（试剂盒由北京诺诗生物技术有限公司提供）扩增DNA并对HLA-DRB1、DRB3、DRB4、DRB5等位基因的23个基因位点进行分型，基因位点血清型名称如下：DRB1基因型包括：DR1、DR103、DR15、DR16、DR17、DR18+、DR4、DR7、DR8、DR9、DR10、DR11、DR12、DR13.1、DR13.3、DR13.4、DR14.1、DR14.2、DR14.3、DR14.4等血清型；DRB3、DRB4、DRB5基因型即分别为血清型DR52、DR53、DR51。扩增基因片段长度在150〜260bp之间。（四）统计学处理各组人群中等位基因的GF（GF&asymp;l-（1-f）1/2）的比较应用X2检验。以Pc<0.05作为差异显著性的判断标准。用Haldane公式计算比值比（OR）,作为判定相关性的依据［1】。二、结果病例组与对照组的HLA-DRB1、DRB3、DRB4、DRB5位点的等位基因...