白介素-24基因在自体移植静脉中表达的实验研究赵晖魏立春邢壮杰李旭李润生(大连大学附属中山医院辽宁大连116001)【摘要】目的研究白介素-24基因(interleukin-24,IL-24)在自体移植静脉内膜增生中的动态表达及意义。方法Wistar大鼠56只，将右颈总静脉端-端吻合于同侧颈总动脉建立自体移植静脉模型。术后随机分别于6h、24h、3d、7d、14d、28d、42d相应时间点切取移植静脉，同时取自身对侧正常颈静脉作为对照组。行HE和Masson特殊染色，观察移植静脉的组织病理学变化，并应用免疫组织化学方法检测其相应蛋白表达情况。同一组内不同时间点比较采用单因素方差分析及q检验，不同组同一时间点的比较釆用配对t检验。结果正常静脉中IL-24基因蛋白表达较强，呈强阳性，单位视野内阳性细胞表达率为25.7plUSmn;2.3%。静脉移植术后随着内膜增生逐渐加重，IL-24基因蛋白表达强度呈逐渐减弱趋势，变化较明显的3个时相(术后lw、2w、4w)单位视野内阳性表达细胞百分率分别为20.1plusmn;3.1%，14.3plusmn;1.4%，7.5plusmn;1.6%,术后2w细胞阳性率较正常对照组有显著降低(P《0.05)；术后4w细胞阳性率较正常对照组有极明显统计学意义(P《0.01)o术后6w细胞阳性率(5.8plusmn;1.4%)较4w比较，降低不明显，无统计学意义(P》0.05)。结论移植静脉内膜早期增生与IL-24的失活表达关系密切，IL-24的正常表达可能抑制移植静脉内膜增生的发生发展。【关键词】IL-24自体移植静脉内膜增生蛋白表达【】R446【文献标识码】A【】1672-5085(2014)03-0031-03动脉旁路转流手术是治疗心血管和周围血管缺血疾病的重要手段之一，目前自体大隐静脉是临床应用最广泛的移植材料，但移植后静脉桥内膜增生及后期的再狭窄、闭塞使手术的一年和十年失效率分别高达15%左右和40%〜50%[1]，患---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---者最终往往面临着截肢，严重影响生活质量。解决静脉桥再狭窄这一难题0前是心脏血管外科研宄的热点。血管内膜增生作为一种增生性疾病，在分子学机理上，类似于良性肿瘤［2】，并且增生过程伴随着明显的炎症反应，我们由此推测，血管内膜增生和类似异常表达的基因关系密切。IL-24是一种能够调控免疫细胞功能的抑癌基因，因此我们通过建立大鼠颈动静脉自体移植模型，采用相应染色方法观察静脉桥狭窄的病理变化，并应用免疫组织化学染色方法动态检测IL-24的蛋白在增生的血管内膜中的表达情况，旨在从细胞形态学和蛋白质水平探讨IL-24与血管内膜增生的关系及所起的作用，为临床从基因水平防治静脉移植术后再狭窄提供更坚实的理论依据。1材料与方法1.1主要手术器械SXP-1B型手术显微镜；显微外科手术器械包（宁波成和显微器械厂）；8/0、10/0带线缝合针（宁波成和显微器械厂）。1.2模型建立Wistar大鼠56只，由大连医科大学SPF实验动物中心提供，许可证号：SCXK（辽）2008-0002,雌雄不限，体质量300plusmn;50g。10%水合氯醛按0.3mL/100g行腹腔注射麻醉。取仰卧位，常规备皮，消毒、铺巾。取右侧胸锁乳突肌前切口，长约3cm,逐层切开皮肤、皮下组织，钝性分离颂下腺，将其上翻,显露并分离颈外静脉，长度约1.5cm。于冋侧胸锁乳突肌与胸骨舌骨肌之间牵幵肌束，显露颈动脉鞘，注意保护迷走神经及滋养小动脉，游离颈总动脉约2cm。取静脉桥长度约lcm,两断端用8/0无损伤缝线结扎，用肝素生理盐水［3］（含肝素12500U/L,罂粟碱0.12g/L）冲洗管腔，直至管壁发白，无附壁血栓，并置于其中保存留用。颈总动脉两端以无损伤血管夹阻断血流，中间切除0.3〜0.5cm,并用肝素盐水冲洗管腔。吻合动脉远心端：将颈动脉远端与颈外静脉分支近心端外膜予以修剪，采用二分法，用8/0无损伤缝线先缝合3点处，结扎后留一短线头用血管夹牵引；用同样方法缝合9点处，牵引；镊子轻拈外膜，自3点至9点将血管前壁间断外翻缝合2〜3针，并打结。翻---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---转血管，用同样方法缝合后壁，打结。吻合完毕后，先放开远心端，再放开近心段，并根据血管充盈和搏动情况及远端勒血试验，来确定血管通畅情况。检查无漏血后，剪除牵引线。用同样方法吻...