MMP-14及CD44V6在胃癌组织中表达的研究吴东海黄震刘圣活(广东省深圳市龙岗中心医院518116)【中图分类号】R730.4【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)26-0087-03【摘要】目的探讨CD44V6、MMP-14的表达与胃癌浸润转移的关系及其意义。方法通过免疫组化方法，用CD44V6、MMP-14的单克隆抗休，以S-P染色法检测CD44V6、MMP-1462例胃癌、62例癌旁组织及10例正常胃黏膜中的表达情况。结果CD44V6、MMP-14在胃癌组织中的表达分别为59.7%(37/62)、58.1%(36/62),癌旁组织中的表达分别为35.5%(22/62)、38.7%(24/62),正常胃黏膜中的表达为0%(0/10)o组间x2检验胃癌与正常胃黏膜、胃癌与癌旁组织CD44V6、MMP-14表达差异均显著P<0.05o结论CD44V6、MMP-14在胃癌组织中的异常表达与其浸润转移密切相关,CD44V6、MMP-14的高表达可能会有助于胃癌的临床诊断，筛选具有转移潜能的肿瘤，成为预测肿瘤转移潜能的新指标。【关键词】CD44V6蛋白胃癌浸润转移肿瘤的浸润与转移是恶性肿瘤的牛物学特征之一，其浸润转移包括粘附、降解和移动的序贯连续的过程，与粘附分子、降解酶类、瘤细胞运动及其受体等因素密切相关。CD44V6就是目前研究较多的一类细胞粘附分子，广泛分布于各种组织细胞中，主要参与细胞一细胞、细胞一基质之间的特异性粘附和细胞转移过程，从而影响癌细胞的浸润与转移。金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)能降解ECM中的各种蛋白成分和基底膜中IV型胶原，与肿瘤的侵袭、转移密切相关。为了探讨CD44V6、MMP-14的表达与胃癌浸润转移的关系，我们进行了如下研究。1材料与方法收集我院2007年2月到2009年12月手术切除并经病理证实为胃癌的---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---62例胃癌标木，同时在距离癌旁5cm处取材与正常胃黏膜组织10例作为对照。所有患者术前均未接受放疗和化疗，其中男40例，女22例。中位年龄53岁32〜79岁。1.2研究方法将石蜡包埋标本制成4&mu;m厚连续切片。免疫组化染色使用二步法，CD44V6和MMPJ4单克隆抗体（即用型）及第二代通用型二步法检测系统（pv-9000）购自北京中杉金桥生物技术限公司。MMPJ4CD44V6在胞浆中呈黄色至深棕色颗粒显色。染色结果按细胞染色强度和染色细胞所占面积二者积分之和来判断。染色强度积分为：不染色=0,轻度染色二1,中度染色=2,强染色二3;染色面积积分为:无细胞染色=0,<25%细胞染色二2,25%〜50%细胞染色=2,>50%细胞染色二3。若2种积分之和>2,则为阳性表达,&le;2则为阴性表达。1.3结果判断标准CD44V6和MMPJ4阳性判断标准：阳性染色者在细胞膜或（和）浆中有棕黄色颗粒沉着。根据免疫阳性细胞染色程度（A）：无染色为0分;细胞膜或浆内见淡黄色颗粒，明显高于背景为1分;较多棕黃色颗粒为2分;大量深棕黄色颗粒为3分。每片随机观察5个视野，计数500个细胞中染色阳性细胞数B：阳性细胞数<5%为0分,5%〜25%为1分,26%〜50%为2分”>50%为3分。A与B相乘为其最后得分，得0〜1分者为阴性（・），2〜3分为阳性（+）,4分及4分以上为强阳性（++）。1.4统计学处理统计分析采用&chi;2检验。2结果2.1CD44V6、MMP・14表达，组间&chi;2检验胃癌与正常胃黏膜、胃癌与癌旁组织表达差异均有显著性（P<0.05）,见表lo表1CD44V6、MMP・14在胃癌、癌旁组织及正常胃黏膜中的表达O注:P*&It;0.05---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---3讨论肿瘤细胞的浸润及转移与肿瘤细胞的运动、黏附，基底膜及细胞外基质的降解等多种机制相关。CD44是位于人类第11号染色体短臂上的基因所编码的细胞黏附分子，是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白。CD44作为淋巴细胞的归巢受体和透明质酸酶的主要受体，能连接细胞外基质中的纤维连接蛋白、层黏蛋白、I型胶原和透明质酸分子以及骨架蛋白相结合，参与细胞的伪足形成，引起细胞形态和游走性改变;作为粘附分子的一种，其主要功能是参与细胞一细胞、细胞一基质之间的特异性粘附过程。研究表明CD44有两种类型，即标准型CD44(CD44S)和变异型CD44(CD44V)。CD44S几乎存在于所有的正常细胞，而CD44V至少有10个亚型(VI〜V10)。不同类型的CD44V蛋白具有不同的...