中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第42卷第6期2011年6月•1066•固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱联用分析荷叶中的生物碱郑振佳1,2,王晓2*,王明林1,王珊珊2,赵先恩21.山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安2710182.山东省科学院中药过程控制研究中心,山东省分析测试中心,山东济南250014摘要:目的建立固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱(SPE-RRLC-Q-TOF联用技术分析荷叶中的生物碱类化合物的方法。方法样品采用1%盐酸超声提取,经固相萃取(SPE小柱净化,再用氨水-甲醇进行洗脱,洗脱液浓缩后用甲醇定容。选用WelchMaterialsC18柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,在正离子模式下,经快速分离液相-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF分析。结果分离并检测了9种生物碱。结论快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱结合阳离子交换固相萃取柱前处理技术,可以快速准确鉴定荷叶中的生物碱成分。关键词:固相萃取;快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱;荷叶;生物碱;阳离子交换:R284.1文献标志码:A:0253-2670(201106-1066-03AnalysisofalkaloidsinNelumbonuciferaleavesbysolidphaseextraction-rapidresolutionliquidchromatography-quadrupole-timeofflightmassspectrometryZHENGZhen-激a1,2,WANGXiao2,WANGMing-lin1,WANGShan-shan2,ZHAOXian-en21.CollegeofFoodScienceandEngineering,ShandongAgriculturalUniversity,Taian271018,China2.ProcessControlResearchCenterofTraditionalChineseMedicine,ShandongAnalysisandTestCenter,ShandongAcademyofSciences,激nan250014,ChinaAbstract:ObjectiveAnovelmethodfortheanalysisofalkaloidsinNelumbonuciferaleaveswasestablishedbySPE-RRLC-Q-TOFmassspectrometry.MethodsThecrudesamplewasextractedby1%HClwithultrasound-assistedextraction,thenpurifiedbySPEcolumn,andelutedwithammonia-methanol(5:95.Afterconcentration,theresiduewasdissolvedbymethanolsolution.TherealsamplewasanalyzedbyRRLC-Q-TOF.AWelchMaterialsC18columnwasappliedintheRRLCseparationusingacetonitrileandwaterasmobilephase.TheelutesweredetectedbyQ-TOFtoobtaintheMSspectrawithextractmolecularweightsunderpositiveionmode.ResultsNinealkaloidswereidentified.ConclusionThismethodcanbeusedtorapidlydeterminethealkaloidsofN.nuciferaleaves.Keywords:solidphaseextraction(SPE;rapidresolutionliquidchromatography-quadrupole-timeofflight(RRLC-Q-TOFmassspectrometry;NelumbonuciferaGaertn.leaves;alkaloids;cationexchange荷叶为睡莲科莲属植物莲NelumbonuciferaGaertn.的叶,药食两用[1]。生物碱是荷叶的主要活性成分之一,传统的分析方法耗时费力,纯化效果和分析的灵敏度也不理想[2-3]。飞行时间质谱具有高分辨率,能够不降低灵敏度而测定化合物精确的相对分子质量,在天然产物分析方面越来越受到重视[4-5]。固相萃取(SPE是对样品富集的一种有效方法,具有很高的选择性,被广泛应用于药物、生物、食品等样品的分析[6-7]。本实验采用SPE技术富集生物碱类成分,消除部分干扰,然后利用快速分离液相-飞行时间(RRLC-Q-TOF质谱对荷叶中的生物碱进行快速的分析鉴定。该分析方法对荷叶提取物指纹图谱的建立、荷叶生物碱的分析检测具有重要意义。1仪器与试药Agilent6520四极杆-飞行时间串联液质联用仪(美国安捷伦公司;Waters高效液相色谱仪(美国Waters公司;ProElutPXC固相萃取柱、ProElutC18固相萃取柱(迪马科技。乙腈为色谱纯,甲醇为分收稿日期:2010-12-08基金项目:国家自然科学基金资助项目(20872083;山东省科技攻关项目(2009GG2001021-16;山东省科学院博士基金项目(科基合字2010第22号;济南市高校院所自主创新计划(201004010作者简介:郑振佳(1985—,山东省烟台市人,在读硕士研究生,主要从事天然产物分离纯化与活性研究。Tel:13615487552E-mail:pengyou-激a@163*通讯作者王晓Tel:(053182605319Fax:(053182964889E-mail:wangx@keylab中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第42卷第6期2011年6月•1067•析纯,实验用水为去离子超纯水;荷...