湖南石菖蒲水提液部位HPLC特征指纹图谱研究赵曦1周晓东2(1吉林大学珠海学院519041;2珠海市食品药品监督管理局519000)【摘要】目的建立湖南石菖蒲水提液部位HPLC分析色谱条件，建立水提液部位标准指纹图谱。方法色谱条件:WatersCosmosilC18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm);流动相：甲醇:3%三乙胺(磷酸调PH到4.0)=56:44;检测波长：245nm;柱温：28°C；流速：l.Oml/min;进样量：15μl。结果标定共有指纹峰6个，峰型较好，峰面积稳定，相似度均在0.90以上，与其他成分分离较好。结论方法准确性可靠，重现性好，可用于石菖蒲药材水提液部位的指纹图谱研究。【关键词】石菖蒲水提液指纹图谱HPLC【中图分类号】R282.71【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)15-0023-03石菖蒲来源于天南星科Araceae菖蒲属Acorus植物石菖蒲AcorustatarinowiiSchott的干燥根茎，根茎中主要含有挥发油，故多重视其挥发油成分的研究。但根据近年来有关石菖蒲水提液部位现代药理研宄的报道，其开窍豁痰、醒神益智、化湿和胃的功效并不局限于挥发油部位。有研宄表明石菖蒲水提液对抗抑郁［1］、抗癫痫［2］及小鼠吗啡依赖戒断［3］具有一定疗效。木文所用石菖蒲来源于湖南，采用水蒸气蒸馏法，去除挥发油得到水提液部位，二极管阵列对最佳检测波长进行筛选，确定相关色谱条件，建立湖南石菖蒲水提液部位特征指纹图谱，报道如下。一材料1,样品来源样品收自湖南邵东县药农，产自附近丘陵，海拔约200米，分为个子货及饮片，带少量泥土，完整者根茎分叉，数量2〜5个不等；表皮红棕色，粗糙，节1.5〜3cm;断面微红色，内皮层环纹明显，可见维管束小点及棕色油点；气芳香，香气浓。经珠海市药监局主任药师、广州中医药大学客座教授周晓东鉴定为天南星科植物石菖■的干燥根茎。采收吋间及规格见表1:表110批湖南石菖蒲药材采收时间及规格2,仪器与药品美国Agilent1200series二极管阵列检测器；日本岛津LC-2010A高效液相相色谱仪；甲醇：色谱纯，购于天津四友生物医学技术有限公司；三乙胺：分析纯，购于广州化学试剂厂；磷酸：分析纯，购于广州化学试剂厂；正丁醇：分析纯，购于广州化学试剂厂；水：超纯水。二方法1，色谱条件WatersCosmosilC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：甲醇：3%三乙胺(磷酸调PH到4.0)=56:44；检测波长：245nm；柱温：28°C;流速：l.Oml/min；进样量：15μl；指纹图谱采集时间60min。2,供试品溶液的制备，取药材5g,粉碎成1〜2cm的粗粒，加20倍量的水，水蒸气蒸榴法提取挥发汕10小吋，弃去挥发油，收集水提液部分，滤过，滤液减压浓缩至1.10〜1.15(50°C),用等量水饱和正丁醇提取4次，合并正丁醇液，减压回收正丁醇，残留物真空干燥(-6.86Kpa,70°C),用水溶解，定容到10ml量瓶中，0.45μm微孔滤膜过滤，进样15μl。3,方法学考察为了考察分析方法的可靠性，选取编号2、3、4的样品，分别对其仪器精密度、稳定性和实验方法重复性作了相应考察。(1)精密度试验取供试品溶液，连续进样6次，相似度值均为1.000,各共冇峰的相对保留吋间和相对保留峰面积的相对标准偏差(RSD)小于3%,结果表明仪器精密度良好。(2)稳定性试验取供试品溶液，分别于配制后Oh、12h、24h、48h进样，相似度值均在0.990〜1.000之间，各共奋峰的相对保留吋间和相对保留峰面积的相对标准偏差（RSD）小于3%，结果表明供试品溶液在室温下放置48h稳定。（3）重现性试验将同一药材样品按2.2项下依法制成5份进样，相似度值均为1.000，各共有峰的相对保留时间和相对保留峰面积的相对标准偏差（RSD）小于3%,结果表明重现性良好。三HPLC指纹图谱的建立1，参照物的选择取批号为09032801的石菖蒲药材，按2.2项下配制供试品溶液，在上述色谱条件下，进样分析，得到HPLC指纹图谱，见图1。由图可见保留吋间为20.2min的色谱峰，峰高最高，峰型较好，峰面积稳定，与其他成分分离较好，因此本研宄选择该峰作为参照物（S）。图1湖南石菖蒲水提液部位参照物图谱2,对照谱图的生成及共有指纹峰的标定取批号09032801〜09032810的10批湖南石菖蒲药材，按2.2项下配制供试品溶液，按上述考察的色谱条件进行分析，得到HPLC指纹图谱，见图2...