不同固定液对脑组织冷冻切片质量影响的研究王灿铭郭振英胡锦林(通讯作者)(浙江省肿瘤医院浙江杭州310022)【摘要】目的分析10%福尔马林、纯丙酮、95%乙醇、甲醇4种固定液对脑组织冷冻切片H-E染色质量的影响，筛选岀一种脑组织冷冻切片的最佳固定液。方法收集手术室送检新鲜脑组织标木，经常规冷冻切片后放入不同固定液，进行H-E染色，观察脑组织冷冻切片细胞收缩程度和染色质量。结果甲醇组细胞收缩不明显，相对于其他组比较差异有统计学意义(P<0.05)；甲醇组组织结构清晰，核浆染色鲜艳，对比度好，相对于其他组差异性显著(P<0.001)。结论甲醇固定脑组织染色效果好，使用方便，满足术中冷冻切片的快速、准确诊断，是脑组织冷冻切片的理想固定液。【关键词】脑组织冷冻切片固定液组织收缩染色质量【中图分类号】R392【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2014)22-0015-02QualityanalysisofbraintissuefrozensectionwithdifferentfixationsolutionCanmingWang,ZhenyingGuo,JinlinHu(Departmentofpathology,ZhejiangCancerHospital,Hangzhou,Zhejiang310022)【Abstract】Objective:Toscreenthebestfixativeonbraintissuefrozensection,weanalysedthat4fixativesincluding10%formalin,pureacetone,95%ethanol,andmethanolimpactonthequalityofH&Estainingquality.Methods:Freshbraintissuespecimenswerecollected,andwemadefrozensectionsinthedifferentfixatives,andobservedbraintissueshrinkageanddyingqualitywithH&Estaining.Results:Cellshrinkageofmethanolgroupwassignificantlylessthanothergroups(P<0.05);Formethanolgroup,organizationstructureismoreclear,thecolorismorebrightandnuclearplasmacontrastishigher,relativetoothergroups（P<0.001）.Conclusion:methanolfixationmethodiseffectiveonstaining,easytouse,andcontributingtotherapidandaccuratediagnosisofintraoperativefrozensection.Methanolisanidealfixativeforbraintissuefrozensection.【Keywords】BraintissuefrozensectionFixativeTissueshrinkageStainingquality随着医疗技术水平的提高，许多脑肿瘤得以明确诊断并进行外科治疗，而脑组织冷冻切片技术和正确的病理诊断是外科手术的有力保障。冷冻切片是新鲜手术标本借助在低温下（-18°C以下），使组织在短吋间内达到一定硬度进行快速切片、染色的一种制片方法［1】。而固定是脑组织冷冻切片的关键，笔者选取几种常用的固定液，通过H-E染色后观察各自固定效果对染色结果的影响，筛选出一种适合脑组织冷冻切片的最佳固定液。1材料与方法1.1材料与设备：选取我院2012年01月至2014年4月送检冷冻切片的脑组织标本150例。德国LeicaCM1900冷冻切片机，日本产Feather一次性刀片,医用耦合剂。1.2固定液：①10%福尔马林；②纯丙酮；③95%乙醇；④甲醇。1.3试剂Gill改良苏木素染色液、醇溶性伊红、梯度酒精和二甲苯等。1.4分组每例脑组织标本常规冷冻切片切2〜3张后，根据研究0的分为4组，各组切片例数为：①10%福尔马林组73例；②纯丙酮组70例；③95%乙醇组79例④甲醇组82例。1.5方法：常规脑组织冷冻切片，厚度8μm左右，放入不冋固定液中固Slmin，Gill改良苏木素染色液染色lmin，水洗后直接用温水（45"C左右）返蓝，伊红染色，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片后显微镜下比较4种固定液的HE染色结果。1.6切片质量评判标准：脑组织冷冻切片完整，无破碎和冰晶，根据镜下细胞的收缩程度评判：细胞基本形态正常，无明显收缩（+）;细胞收缩（++）;细胞收缩严重(+++)。根据切片染色质量评判：组织结构清晰，细胞核染色鲜艳，核浆对比好(+)•，组织结构清晰度一般，染色质略模糊，核浆着色不鲜艳(++);染色质模糊不清或核仁未见，核浆对比差，层次不清(+++)。1.7数据处理：采用SPSS21.0统计软件对数据进行统计分析，计数资料用率(％)表示，行χ2检验，比较差异用P<0.05表示有统计学意义。2结果2.14组脑组织冷冻切片镜下细胞收缩程度比较镜下观察细胞的收缩程度，甲醇组收缩要小于其他组，与10%福尔马林组、纯丙酮组、95%乙醇组比较差异有统计学意义(&...
