异型流感病毒感染小鼠肺巨噬细胞MHC-I和Notch配体DLL1表达研究#杨松，薛琨，刘思楠，原野，金红**5摘要：目的（中国医科大学基础医学院病原生物学教研室，沈阳110001）为了揭示机体对异型流感病毒感染交叉免疫保护作用的机制。方法本研究用小鼠作为动物模型，感染与免疫型别不同流感病毒时，用实时定量PCR方法检测肺巨噬细胞NotchligandDelta-like1(Dll1)及与CTL反应密切相关MHCI基因表达情况，并用流式细胞术测定IFN-γ阳性CD8+T细胞水平变化。结果感染异型流感病毒后肺巨噬细胞Dll1及101520MHCI表达水平明显升高，其升高程度大于同型感染对照组和未免疫感染对照组（P<0.05）；异型感染组在感染后第7天，脾中IFN-γ阳性CD8+T细胞水平明显高于感染前，并高于同型感染对照组及未免疫感染对照组（P<0.05）。结论肺巨噬细胞Dll1及MHCI表达可能在CTL为主的流感病毒异型间交叉保护免疫应答反应中起重要作用。关键词：流感病毒；异型；Notch-Dll1；MHCI；CTL：R373Notch-Dll1andMHCIexpressioninpulmonaryalveolarmacrophagesofmiceinfectedwithheterosubtypicinfluenzavirusYangSong,XueKun,LiuSinan,YuanYe,激nHong(Departmentofmocrobiologyandparasitology,ChinaMedicalUniversity,ShenYang110001)Abstract:ObjectiveTorevealmechanismofcross-protectiveimmunitytoheterosubtypicinfluenzavirus.MethodsThemRNAexpressionofNotchligandDelta-like1(Dll1)andMHCclassImoleculeweredetectedusingreal-timePCRinpulmonaryalveolarmacrophages(PAM)of25303540mice,andthepercentagesofIFN-γ+CD8+Tcellsinspleenwereanalyzedusingflowcytometry.ResultsThemRNAexpressionofDll1andMHCclassIinPAMwereupregulatedduringheterosubtypicimmunity(HSI)againstinfluenzavirus,comparedtocontrolgroups（P<0.05）,andthepercentageofIFN-γ+CD8+TcellsinspleensignificantlyincreasedafterchallengeinHISgroup,comparedtocontrolgroups（P<0.05）.ConclusionOurstudysuggestedthatDll1andMHCclassImoleculeinPAMplayedactiverolesbypromotingCytotoxicT-lymphocytes(CTL)differentiationduringHSIagainstinfluenzavirus.Keywords:Influenzavirus;Heterosubtypic;Notch-Dll1;MHCI;CTL0引言流行性感冒病毒属于正粘病毒科，病毒核酸为分节段的单链负股RNA，分为甲、乙、丙三型，又可根据表面抗原血凝素（Hemagglutinin，HA）和神经氨酸酶（Neuraminidase,NA），2]皆可被感染。流感病毒（特别是甲型流感病毒）最大的特点是容易发生变异。目前国内外生产的流感病毒疫苗，是几种常见流行株组合产品，是通过产生中和抗体预防流感病毒感染，只对控制所含型别流行有效，对新出现变异株无效。而正规研制新型流感疫苗需要9个月的时间[3]。到目前为止尚无有效的抗变异流感病毒感染疫苗。Tamura等[4]认为机体对流感病---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---分为不同亚型。常由甲型引起大流行[1。甲型流感病毒宿主范围广，许多哺乳动物及禽类基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（20102104110018）作者简介：杨松，女，博士研究生。通信联系人：金红，女，(1962-)，教授，博士生导师。主要研究方向：流感病毒防御机制及方法研究.E-mail:激nhongf@sina-1----本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---毒不同型别间交叉保护作用，常由流感病毒共有核蛋白（NP）主导，其中细胞毒性T细胞（CytotoxicTlymphocyte,CTL）反应起重要作用。自然产生的异型间交叉保护免疫作用弱，难以完全抵御异型流感病毒感染。我们的目标则为弄清其机制，寻找提高机体交叉保护效率45505560的方法。我们做了相关的前期研究工作[5],发现小鼠感染与免疫型别不同的异型流感病毒后IFN-γ水平显著升高，与同型感染组和未免疫感染组比较具有统计学意义。Billiau等[6]指出，IFN-γ与机体再次接触病毒抗原而引起的细胞免疫应答反应有关。IFN-γ是活化的淋巴细胞分泌的细胞因子，具有上调单核细胞表面MHC-I类分子表达、活化巨噬细胞、促使CD8+T细胞成熟为效应CTL细胞等...