PLCe1基因在食管癌发生、进展中的作用及机制研宄陶佳川北医学院病理教研室四川南充637000【摘要】目的探讨PLC&epsilOn;l基因在食管癌发生、进展中的作用及机制.方法随机选取2010年1月〜2015年1月收治的食管癌患者520例和健康对照个体520例，采集研究对象静脉抗凝血5ml,应用蛋白酶K消化—饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,并用PCR-LDP方法行基因分型，探讨其于食管癌遗传易感性间的关系.结果观察组UGIC家族史阳性比例明显高于对照组，差异明显(P<0.05);观察组患者,PLC&印silon;1基因分型分布符合Hardy—Weinberg平衡(P〉0.05),携带AG/GG基因型家族史阴性个体、携带AG/GG基因型家族史阳性个体RSCC发病风险较高.结论食管癌为常见癌变，在发生与进展中,PLCε1基因发挥着重要作用，可作为人群ESCC发病风险标志物之一.【关键词】PLCε1基因；食管癌；进展；机制；研究【中图分类号】R735【文献标识码】B【文章编号】1001—5302(2015)09-0716—02食管癌为临床常见的癌变类型之一，是环境以遗传因素综合叠加的结果，感染、吸烟与饮酒等均可增加食管癌的发生几率.在目前的临床研究上,食管癌发生、进展机制研宄已经取得了较大成果[1].PLCε1基因为Ras原癌基因效应子，在肿瘤发牛.、进展中发挥着重要的作用.探讨其在食管癌发牛.、进展中的作用与机制，对于提高食管癌的预防、治疗具有重要意义[2].木研究通过比较,探讨了PLCε1基因在食管癌发生、进展中的作用与机制，现报道如下.1资料与方法1.1一般资料随机选取2010年1月〜2015年1月期间我院附属医院收治的食管癌患者520例和健康对照组个体520例作为研宄对象.食管癌患者均经内镜普查与本地医院经组织学检查确诊，住院或门诊患者，均为鱗状细胞癌.同期，选择健康对照组内镜检查无消化道肿瘤（UGIC）个体方中，观察组男性340例，女性180例，年龄31-84岁，平均年龄（61.5±3.6）岁;健康对照组男性341例，女性179例，年龄32-82岁，平均年龄（62.5±2.3>岁.通过询问获取两组患者吸烟习惯、家族史等.两组患者在年龄、性别及血样采集等方面无明显差异（P〉0.05）,存在可比性.1.2方法采集患者静脉血5ml,放置于4°C冰箱中，并于采血7d后提取外周血白细胞DNA.其中，研究对象外周血DNA提取用蛋白酶K消化一饱和氯化钠盐析法:（1）将5ml外周血加入冷蒸馏水45ml,以2500rpm速度离心15min,并弃上清，里复2〜3次,直至红细胞全部裂解为止;（2）加入45ml0.1%Triton—X100,并以2500rpm速度离心15min,弃上清;（3）加入3mIDNA提取液，充分混合均匀，并悬浮白细胞;（4>加入10%SDSl5Oul,剧烈振荡，直至无凝块后;（5）将上清置入另外一个玻璃瓶中，在上清中加入8ml无水乙醇,并混合均匀;（6）弃70°%乙醇，并将Ep管倒置，待乙醇发挥干净后，按照DNA团块,适量加ATE溶解DNA;在4°C室温中放置24h以上，待其完全溶解后，测定DNA纯度与浓度[3].1.3PLCε1基因分型分析使用聚合酶链反成一连接酶检测反成（PCR—LDR）分析PLCε1基因分型、分为两种基因类型，即rs2274223A/GSNP与rsl1599672T/GSNP[4].1.4计学方法本研究数据均采用SPSS14.0软件包进行处理，两组基因型频率分布比较使用卡方检验，单体型频率与连锁不平衡分析，采用2LD与EH软件分析，以P<0.05表示差异显著,非条件Logistic回归分析风险向，以95%为可信区间.2结果2.1PLCε1基因rs2274223A/GSNP与食管癌的关联性通过PCR与LDR法检测两组患者的rs2274223A/GSNP基因型，在对照组中，其符合Hardy-Weinberg平衡（p〉0.05），对照组rs2274223A/GSNP频率为69.5°%、A频率为30.4%、G等位基因频率为75.4°%,明显低于观察组等位基因频率，差异明显（P<0.05具冇统计学意义.按照患者性别、吸烟史与年龄等分层分析,≥60岁存在较长吸烟史的男性，以及UGIC家族史阴性个体发生食管癌的危险性较高.2.2PLCε1基因rs11599672T/GSNP与食管癌发生的关联本研究纳入的两组患者的DNA血样标本,均使用PCR-LDR法检测rsl1599672T/GSNP基因型，对照组的基因型符合Hardy—Weinberg平衡(P<0.05其中,PLCε1基因中T、G等位基因的频率分别为73.4%、27.1%、72.5%级27.1°%...
