枳实炮制方法研宄赵玉静（沈阳市皇姑区亚明社区卫生服务中心辽宁沈阳110031）【摘要】目的研究枳实的炮制方法。方法利用甲醇提取，通过聚酰胺柱，用水洗脱，提取枳实中的辛弗林，并用HPLC方法对其进行测定，并对枳实生品及麸炒品中辛弗林进行测定和比较。结果：烘制、麸炒过程对枳实中辛弗林含量有一定的影响，烘制的方法作为枳实的炮制法具有可行性。【关键词】辛弗林；HPLC【中图分类号】R28【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2014）15-0274-02枳实为临床常用中药，为芸香科植物酸橙CitmsaurantiumL.及其栽培变种或甜橙CitrussinensisOsbeck的干燥幼果。兵有破气消积，化痰散痞等功效。临床用于积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通，痰滞气阻，胸痹，结胸，脏器下垂。鉴于枳实的良好活性作用，对枳实进行系统研究。木研究旨在研究传统炮制过程对枳实有效成分的影响。根据报道，枳实的主要有效成分为生物碱类的辛弗林，因此木实验研宄炮制工艺对枳实辛弗林化学成分的变化，同时研宄烘制法对枳实辛弗林化学成分的影响，确定枳实的炮制条件。1.仪器与试剂：1.1仪器P230II大连依利特（UV230II紫外检测器，EC2006-色谱数据处理工作站），KQ3200超声波清洗器（江苏昆山）1.2试药枳实药材（产地江丙，经鉴定为芸香科植物酸橙及其栽培变种或甜橙的干燥幼果）；辛弗林对照品（中国药品生物制品检定所，纯度>98%）;高效液相色谱用水为纯净水，甲醇为色谱纯；磷酸二氢钾、十二烷基磺酸钠、冰醋酸等试剂为分析纯。2.方法与结果2.1辛弗林的含量测定方法2.1.1色谱条件WelchUltimateLP-C18（250mm×4.6mm,5μm）；流动相：甲醇-磷酸二氢钟溶液（取磷酸二氢钾0.6g，十二烷基磺酸钠l.Og，冰醋酸lml,加水溶解并稀释至1000ml）（50:50）为流动相，检测波长：275nm,流速：1.0mL/min;柱温：30'C。2.1.2供试品溶液制备［3］取本品中粉约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml,称定重量，超声处理（功率240W,频率45kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml,蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过聚酰胺柱（60〜900,2.5g,内径为1.5cm，干法装柱），用水25ml洗脱，收集洗脱液，转移至25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。2.1.3对照品溶液制备［3］辛弗林对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含30μg的溶液，即得。2.1.4空白试验吸取溶剂20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果无干扰。2.1.5测定结果分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液20μL。依次进样，在上述色谱条件下测定，记录色谱图，如下（图1，2）。图1对照品的HPLC色谱图图2.供试品样1的HPLC图谱图3.空白试验HPLC图谱2.2含量测定方法学考察2.2.1标准曲线的绘制精密称取辛弗林对照品适量，加甲醇制成0.028mg/ml的溶液。精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别至于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。分别量取20μl,注入HPLC色谱仪中，按上述色谱条件测定，测定峰面积。以对照品溶液的进样量为横坐标,峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程:Y=469.777492X-8.046891,「=0.9997。结果表明，辛弗林在0.28〜1.40μg之间峰面积于进样质量有良好的线性关系。表1线性范围试验结果图4.标准曲线及线性范围2.2.2精密度试验精密吸取对照品溶液，按照“标准曲线的绘制”项下，依法连续测定6次，RSD为0.50%,表明本方法精密度良好。2.2.3稳定性试验取同一供试品溶液，于0、2、4、6、8、10h测定辛弗林色谱峰面积，测定结果RSD为1.05%,结果表明，溶液在10h内基本稳定。2.2.4.重复性试验取样品，按2.1项下供试品溶液制备，根据2.3项下色谱条件及检测方法测定5次，记录峰面积，测定结果RSD为1.01%,表明方法重复性良好。2.2.5回收率试验分别精密称取枳实样品lg，加3.5mg/ml对照品1ml，按2.1.2项下方法处理，按2.1.1项下色谱条件进行测定，按外标法以峰面积计算回收率，结果RSD值为1.41%，表明方法的冋收率试验符合相关要求。结果见表5。表5冋收率试验试验结果2.3枳实加热处理的方法［3-4】取净枳实生品10g,于粉碎机中粉碎5次（每次大约10秒），过筛，将粉末分成7份，留取一份...