文心兰花发育相关基因0AP3和6^4似W的表达分析徐小雁：'2,龙明华1#,田敏2(1.广西大学农学院，南宁530003:2.中国林科院亚热带林业研究所，富阳311400)摘要：为研究兰花MADS-box基因的表达与花器官发育之间的关系，以文心兰(OncidiumMilliongolds)为材料，通过荧光定量实验对文心兰屮AP/家族成M和AP3家族基因OAP3进行了表达分析。qRT-PCR表达分析表明：OMADSW和OAP3基因在花芽生长的整个过程中都表达，且都在营养器官(叶片，茎)和花器官所有部位中表达，但表达量存在明显差异：OMADS10在合蕊枕屮强烈表达，M:次是花瓣。OAP3在花萼中强烈表达，其次是合蕊柱。关键词：文心兰；花器官形成；0扁仍6基因；O4PJ基因；qRT-PCRExpressionAnalysisofFlowering-relatedgeneOAP3ar\6OMAOS6\r\OncidiumXUXiao-yan1，2，LONGMing-hua112，TIANMin2(1.Agriculturalcollege,GuangxiUniversity,Nanning530003,China;2.ResearchInstituteofSubForestry，ChineseAcademyForestry,Fuyang311400,Zhejiang,China)Abstract:ToexplorethetherelationshipbetweenorchidMADS-boxofgeneexpressionandfloralorgandevelopment,TheexpressionofOMADSIOandOAP3geneinOncidiumMilliongoldsdetectedbyqRT-PCR.qRT-PCRanalysisshowedthat(9A/A/)S7OandOAP3mRNAwasdetectedduringallthedevelopmentofflowerbuds,whichalsodetectedinallfourfloralorgansaswellasinvegetativeleavesandshoots.Butexpressionobviouslydifferent:OMADSIOstronglyexpressingincolumn，followedbypetals.OAP3stronglyexpressinginsepals,followedbycolumn.Keywords:OncidiumMilliongolds；Floralinitiation；OMADSIOgene；OAP3gene；qRT-PCR1收稿曰期：基金项目：W家林业部948项H(No：2008-4-25)；浙h:省花卉产业创新团队项H。作者简介：徐小雁，硕上研究生，主耍从事作物细胞工稍与生物技术研究。E-mail：xuxiaoyanhope@163.com2通讯作者：龙明肀，博士，教授，主耍从事蔬菜花卉育种、无土栽培技术和组织培养技术及无公害农产品生产技术的科研教学T作。E-mail：longmhua@163.com---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---ABC模型通过三类同源异型基W的相互作用预测了植物花器官的形成f11，从模式植物拟南芥屮已经分离出的这类同源异型基因有：APETALAl(APl),APETALA2(AP2)fAPETALA3(AP3),PISTILLATA(PI),AGAMOUS64G)等［2］。这些基因巾，除了AP£7XM2(AP2),都是MADS-box基W家族，因此MADS-box基因在花发育过程中起叉键作用［2"3］。到鬥前为止,对参与花发育过程的MADS-box因的研究多集中介:拟南芥、矮牵牛、金鱼草、水稻和玉米［4］等模式植物，关于兰花MADS-box基W的研究报道较少［5］。兰科属于世界网个特人科之一，起源古老，进化速率极其不同步，足种子植物系统发育在单子叶植物屮的一个高峰，具有典型性和代表性［6］。兰花花器官结构高度特化：1片花瓣变异为唇瓣，雌雄蕊合在一起成为蕊柱。因此其花器官的形成町能具有独特的调控机制，这为研究ABC功能基因提供了新的平台和视角，并可能会拓展经典ABC功能基因概念的外延。文心兰(OncidiumMilliongolds)具有典型的兰科植物的花器官特征，如较人的F瓣、明显的合蕊柱等，为研究花发育基因在兰科植物屮的功能提供较为现想的试验材料。利川qRT-PCR(FluorescenceQuantitativePCR)技术检测文心兰巾己克隆出的API同源基因OM4D570和AP3同源基因OAP34:花芽不同发育时期和不M器官的表达特性，S在为进一步研究兰花花器官发育的分了•调控机制奠定菽础，为兰花分了育种捉供理论依裾。1材料与方法1.1实验材料不同生长阶段和花器官样品摘取不同直径的花芽，按直径人小分为小花芽(小于2mm),中花蕾(2-5mm),大花蕾(5-1Omm)和张开的花朵(阁1),每个样6-12个。分别剥取张开花朵的花萼、花瓣，、唇瓣、合蕊柱，液氮速冻存放于-80°C冰箱。小花芽中花蕾人花蕾张开的花朵---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---图1不同大小的文心兰花芽Fig.lDifferentsizebudsinOncidiumMilliongolds1.2总RNA的提取及基因全长克隆总RNA提取依照柱...