热缺血再灌注损伤早期大鼠肝脏基因表达谱的实验研究【摘要】目的探讨热缺血再灌注损伤(WIRI)早期大鼠肝脏基因表达谱的差异。方法建立SD大鼠肝脏热缺血再灌注损伤模型,取再灌注30min和再灌注1h肝组织标本,采用基因表达谱芯片技术检测各组基因表达的变化情况,确定差异表达基因。结果筛选出大鼠肝脏再灌注30min、再灌注1h两组共同差异表达基因有77条,其中表达上调56条,表达下调21条。再灌注30min或1h表达上调的基因数均多于表达下调基因数,再灌注1h表达发生变化的基因总数多于再灌注30mino?Y论大鼠肝脏热缺血再灌注损伤伴随多基因的表达谱改变,再灌注损伤早期的差异表达基因为研究肝脏WIRI的分子机制提供实验依据。【关键词】肝脏;基因表达;再灌注损伤中图分类号:R657.3文献标识码:ADOI:10.3969/j.issn.10031383.2017.01.006Aexperimentalstudyongeneexpressionprofilesinratsliveratearlyphaseofwarmischemiaandreperfusioninjury[HJ1][HJ]---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---LIWenchuanl,GAOLiangkuil,LIHaohangl,XUZuomingl,LUOZongjiangl,WANGJianchu2,LUTao2,PUJian2A(1.GraduateSchool,2.DepartmentofHepatobiliarySurgeryofAffiliatedHospital,YoujiangMedicalUniversityforNationalities,Baise533000,China)[HJ2][HJ][Abstract】ObjcctivcToexploredifferenceofgeneexpressionprofilesinratsliveratearlyphaseofwarmischemiaandreperfusioninjury(WIRI)・MethodsLiverWIRImodelofSDratswasestablished,andlivertissuesampleswith30minand1hofreperfusionweretaken.Geneexpressionmicroarraywasusedtodetectchangesofgeneexpressionineachgroup,soastoidentifydifferentialexpressedgenes(DEGs)•ResultsTheanalysisdataofthemicroarrayshowedthattherewere77commonDEGsinclucling56upregulatedgenesand21downregulatedgenesatboth30minand1hofreperfusion・Thenumberofupregulatedgenesat30minor1hofreperfusionwaslargerthanthatofdownregulatedgenes.AndthenumberofDEGsat1hofreperfusionwaslargerthanthat30minofreperfusion.ConclusionWIRIofratsliversarealwayscomplicatedwithprofilechangesofmultigeneexpression,anddifferentialexpressedgenesatearlyphaseofreperfusioninjurycanprovideexperimentalbasistomolecularmechanismofliverWIRI.[Keywords]liver;geneexpression;reperfusioninjury肝脏热缺血再灌注损伤(warmischemiaandreperfusioninjury,WIRI)是---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---肝移植和肝脏切除术中出现的主要临床问题[1]。其主要特征在于肝细胞损伤、无菌性炎症及术后肝功能障碍[2]。研究表明[3〜4]热缺血诱导的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)生成及许多炎症介质的释放有助于并加重再灌注早期诱导组织损伤。因此,本实验釆用基因表达芯片技术对WIRI早期大鼠肝脏基因表达谱的改变进行大规模、高通量、并行分析,初步筛选再灌注损伤早期调节其表达显著的功能基因,并讨论与以前研究的相似性和差异性,为进一步阐明热缺血再灌注损伤早期的分子调控机制提供理论基础。1材料与方法1.1实验动物模型的建立SPF级雄性SpragueDawley(SD)大鼠16只,体重320~380g,由右江民族医学院动物中心(许可证号:SCXK桂20120003)提供。术前禁食但可适量饮水。称重后采用10%水合氯醛300mg/kg腹腔注射麻醉,取腹部纵切口,离断镰状韧带及左右三角韧带,分离肝胃韧带,游离门静脉及肝固有动脉。3minJri将门静脉和肝固有动脉阻断30min,造成原位肝脏热缺血模型,切取标本,即热缺血30min组。再灌注损伤组为阻断30min后恢复肝脏血流后30min.1h分别切取标本。假手术组仅常规进腹后,游离但不予结扎肝十二指肠韧带内血管,30min后切取标本。1.2动物分组与収材将16只大鼠按热缺血及再灌注的不同时间随机分四组,每组4只。分为:假手术组、热缺血30min组、再灌注30min组、再灌注1h组。四组均在肝脏中叶相同部位取材。全部标本分为2份,1份固定于10%甲醛溶液中,制作石...