第1页共8页金银忍冬多糖提取工艺研究[摘要]目的:研究金银忍冬中多糖的最佳提取工艺。方法:采用正交试验确定各因素的影响大小,确定金银忍冬中多糖的最佳提取条件,用水提醇沉方法提取多糖,苯酚-浓硫酸法测定多糖含量。结果:温度对金银忍冬多糖提取影响作用最大,金银忍冬多糖的最佳提取工艺:温度为90℃;提取3次,3h/次。结论:该研究可为金银忍冬多糖工业化提取提供理论依据。[关键词]金银忍冬;多糖;正交试验法;提取工艺[]R943[文献标识码]A[]1673-7210(2010)06(a)-069-02StudyonextractionprocessofPolysaccharideinLoniceraMaackiiHEYing,ZHOUWei,ZHANGLianxue*(CollegeofChineseMedicinalMaterials,激lin第2页共8页AgriculturalUniversity,Changchun130118,China)[Abstract]Objective:TooptimizetheextractionprocessofpolysaccharideinLoniceraMaackii.Methods:Thecontentofpolysaccharidewasdeterminedbywaterextracting-alcoholprecipitateingandphenol-concentratedsulphuricacid.Theinfluenceofeachfactorwasmeasuredbyorthogonalexperiment.Results:Thetemperaturehadthegreatesteffectontheextractionofpolysaccharide.Theoptimalconditionwasasfollows:90℃,andextraction3(3heachtime).Conclusion:Thisstudyprovidesthetheorybasisfortheindustrialproduction.[Keywords]LoniceraMaackii;Polysaccharide;Orthogonaltest;ExtractionProcess金银忍冬(LoniceraMacckiiMaxim.)为忍冬科忍冬属植物,又名金银木(山东)、王八骨头(吉林)等[1]。经研究发现,金银忍冬的第3页共8页绿原酸含量略高于金银花,且对于风热感冒和小儿肺炎都有较好的疗效[2-3]。可以考虑将其作为金银花的替代资源。多糖具有广泛的生物活性,在医学和兽医临床上研究应用也较广泛,可作为免疫促进剂或调节剂。大量体内外实验及临床研究表明,多糖具有增强机体免疫功能、强心降压、降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效[4-6]。目前尚未见关于金银忍冬多糖的研究报道,因此,本实验采用正交试验优选了金银忍冬多糖的提取工艺。1仪器与试药1.1仪器RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);SHB-BA95型循环水是多用真空泵(河南巩义市英峪予华仪器厂);DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司);HH-S.Z.W型数显电子恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司);UV-754紫外可见分光光度计(山东彩虹分析第4页共8页仪器有限公司);GL-21LM高速冷冻离心机(湖南星科科学仪器有限公司)。1.2试药金银忍冬采自集安,经我校园艺学院郭太君教授鉴定为金银忍冬;乙醚(分析纯,北京化工厂);无水乙醇(分析纯,北京化工厂);苯酚(分析纯,北京化工厂);浓硫酸(分析纯,北京化工厂);葡萄糖(分析纯,北京化工厂)。2方法与结果2.1正交试验按照预试验的提取工艺,经过多次单因素对比试验,将影响提取最重要的因素确定为水浸提温度、浸提时间、浸提次数3个因素,每个因素考察3个水平,见表1。以金银忍冬多糖的含量为考察指标,用L9(33)正交表安排试验。表1正交试验因素与水平设计Tab.2orthogonaltestfactorsandleveldesign第5页共8页2.2标准曲线制备精密称取105℃干燥恒重的无水葡萄糖10mg,置于100ml量瓶中,蒸馏水定容。分别精取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0ml于具塞试管中。以水做空白,分别加6%苯酚1.5ml,浓硫酸7.5ml,冷却,定容至10ml,摇匀,冷却,在490nm测定吸光度值。以浓度为横坐标,吸光度A值为纵坐标,代入回归方程Y=59.4140X+0.0014(r=0.9990),结果表明多糖在1.037～10.03μg/ml范围内呈良好的线性关系。2.3多糖的提取取金银忍冬药材粉末(20目)9份,各20g,加200ml乙醚,脱脂,残渣挥尽乙醚,加200ml蒸馏水,分别以规定时间,规定温度,规定提取次数进行提取。同种方法所得的滤液合并,浓缩至约50ml,加无水乙醇至浓度为80%,静置过夜,离心(3500r/min)15min,除去上清液,收集沉淀,干燥,既得金银忍冬粗多糖。第6页共8页2.4样品中多糖含量的测定取金银忍冬粗多糖25mg,置100ml量瓶中,蒸馏水定容,既得样品溶液。分别取各样品溶液1ml,置于10ml具塞试管中,以水做空白,分别加6...