肿瘤相关巨噬细胞在结肠癌中的浸润及其与EGFR的相关性分析易俊松1龚治林21湖北省荆州市第五医院4340202华中科技大学同济医学院附属荆州医院434020【摘要】目的：观察结肠癌组织及癌旁组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与EGFR的表达情况并探讨两者的相关性。方法：通过免疫组织化学方法检测结肠癌组织及癌旁组织中TAMs的特异性标志物CD68的表达以及EGFR的表达情况,比较TAMs和EGFR在结肠癌组织及癌旁组织的浸润强度并采用Spearman相关分析癌组织中两者平均IOD值的相关性。结果：TAMs在95例结肠癌中的表达阳性率为85.3%(81/95),其阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤的病理类型无统计学差异(P>0.05),TAMs的阳性率与肿瘤的分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移与否、刖|瘤的侵润深度有关(P<0.05),TAMs在癌肿组织阳性高于癌旁组织，两者Z间的差异具有统计学意义，TAMs与EGFR在结肠癌中的表达呈正相关(r=0.624,P<0.05)o结论：TAMs在结肠癌中有明显的阳性表达，TAMs可能作为一个肿瘤治疗的新靶点，抑制肿瘤的生长。【关键词】结肠癌；TAMs；巨噬细胞；EGFR【中图分类号】R735【文献标识码】A本实验通过免疫组化检验TAMs的特异性标记物CD68在结肠癌组织中的表达情况，并通过其与EGFR的相关性研究探讨TAMs在结肠癌中的生物学意义。1材料与方法1.1一般资料选择我院普外科2013年7月一2014年7月手术切除的结肠癌标本共计95例，术前均未行放化疗。患者男性50例，女性45例；年龄38・74岁，平均年龄59.8岁；组织学类型；乳头腺癌44例，管状腺癌22例。粘液腺癌29例；高、中分化49例，低分化46例；淋巴结转移53例，无淋巴结转移42例；浸润深度：侵及浆膜48例，未侵及浆膜47例；肿瘤分期：1+11期45例，III+IV期50例。手术切除标本均经病理科2位以上资深医师证实为癌。所以标本常规石蜡包埋，切片。1.2试剂、仪器及实验方法试剂：兔抗人CD68单克隆抗体购于Abeam公司(英国)，EGFR抗体购于福州迈新生物技术有限公司，DAB显色剂购于Dako(丹麦)。仪器：OlympusBX51显微镜、电烤箱，医用冰箱。实验方法：采用SP免疫组化方法，结肠癌组织及癌旁组织由4%的多聚甲醛固定，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，3.5&mu;m切片。组织切片经烤片，二甲苯脱蜡，梯度洒精水化。枸椽酸钠盐高压热修复3分钟，后冷却至室温。3%过氧化氢室温孵育15分钟，山羊血清封闭非特异性抗原。一抗4°C孵育过夜。生物素标记的二抗室温孵育15分钟。链霉素抗生物素蛋白室温孵育15分钟。显微镜下DAB显色，苏木素复染。脱水，封片。1・3免疫组织化学染色结果分析每张切片随机采集5个视野，采用图像分析软件(lmage・proplus6.0)计算其单位面积平均光密度值(I0D)1.4统计学方法数据分析采用SPSS19.0完成。计数资料的比较采用卡方检验Spearman相关分析对肿瘤组织中的CD68和EGFR的表达进行相关性分析。双侧检验P<0.05表示有统计学意义。2结果2.1TAMs在结肠癌中的表达与患者的临床病理特征95例接受根治性结肠癌手术患者的临床标本中，CD68的阳性表达者为81例(85.3%)oCD68在结肠癌中的阳性表达与患者的性别、年龄及肿瘤的组织学类型无明显相关。高、中分化程度标本为49例，其中阳性表达者为38例，低分化者为46例，其中阳性表达者为43例，两者之间差异具有统计学意义(P二0.0291);有周围淋巴结转移者为53例，其中CD68表达阳性者为49例，无淋巴结转移者为42例，其中CD68阳性表达者占32例，两者之间差异具有统计学意义(P=0.026)；肿瘤浸润深度达浆膜者为48例，其中CD68表达阳性者为45例，未侵及浆膜者为47例，其中CD68阳性表达者占36例，两者之间差异具有统计学意义(P二0.018)；肿瘤分期为1+II者为45例，其中CD68表达阳性者为34例，肿瘤分期为III+IV为50例，其中CD68阳性表达者占47例，两者之间差异具有统计学意义（P=0.011）o（表1）表ITAMs在结肠癌中的表达与患者的临床病理特征（图3）3讨论结肠癌是常见的消化道肿瘤之一，尽管在诊断和治疗方面取得了巨大的进展,其复发和转移仍I口是治疗失败的重要原因。因此寻找判断结肠癌恶性程度的相关肿瘤标记物对于目前的结肠癌的诊治具有重要的意义。在上皮性肿瘤如结直肠癌、胃癌中，长期的慢性炎症性疾病能够增加原...