生脉饮复方制剂对病毒性心肌炎细胞凋亡作用的研究doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2014.22.3摘要目的：研究生脉饮对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡作用的影响。方法：用柯萨奇B病毒建立感染的心肌细胞模型，在感染后24小时将细胞分为正常对照组、病理模型组、生脉饮组和辅酶Q10组。4组分别在不同时间点观察细胞形态，并采用TUNEL法进行细胞凋亡的检测。结果：在48小时点开始检测，正常対照组无细胞凋亡，生脉饮组及辅酶Q10组均有凋亡，生脉饮组凋亡率低于辅酶Q10组（P〈0・05）,病理模型组随着时间的推移，凋亡率增加，72小时点明显高于48小时点（P〈0.01）,与药物干预组比较差异具有统计学意义（P〈0・05）。结论：生脉饮能够有效抑制病毒性心肌炎心肌细胞的凋亡，且应该早期干预。关键词生脉饮；病毒性心肌炎；细胞凋亡Studyontheapoptosiseffectofpulse-activatingdecoctioncompoundpreparationinviralmyocarditisXiongLihuil,SunDashan2BasicMedicalColleg,ChangchunTraditionalChineseMedicineUniversity,13011712012GradeTraditionalChinesemedicineProfessionalExperimentalClass,GuangzhouTraditionalChineseMedicineUniversity(GuangzhouCity,Guangdong),1301172Abstractobjective:Tostudytheeffectofpulse~activatingdecoctioncompoundpreparationinmyocardialapoptosiseffectofviralmyocarditis・Methods:UsingcoxsackieBvirusestablishedinfectiousmyocardialcel1model.Tn24hoursafterinfection,thecellsweredividedintofourgroups：thenormalcontrolgroup,thepathologicalmodelgroup,thepulse-activatingdecoctiongroupandthecoenzymeQ10group.ThecellularmorphologyoffourgroupsofcellsworeobservedatdifferenttimepoinIs.TheapoptosiswasdetectedbyTUNELmethod.Results：Begintestingat48hours,thenormalcontrolgrouphadnoapoptosis；thepulse-activatingdecoctiongroupandthecoenzymeQ10groupallhadapoptosis；theapoptosisrateofthepulse-activatingdecoctiongroupwaslowerthanthatofthecoenzymeQ10group(P<0.05)・Inthepathologicalmodelgroup,theapoptosisratewasincreasedastimegoeson.72hourspointwasobviouslyhigherthan48hourspoint(P<0.01)・Therehadstatisticallysignificantcomparedwiththedruginterventiongroup(P<0.05).Conclusion:Pulse-activatingdecoctioncaneffectivelyinhibitthemyocardialcellapoptosisofviralmyocarditis,anditshouldbeearlyinterventeckKeywordsPulse-activatingdecoction；Viralmyocarditis；Apoptosis病毒性心肌炎(viralmyocarditis,VM)是指病毒感染引起的心肌局限性或弥漫性的急慢性炎性病变，多由柯萨奇病毒引起。在柯萨奇病毒导致VM的病理机制研究中，越来越多的证据表明，柯萨奇病毒导致病毒性心肌炎心肌细胞凋亡，从而出现心肌坏死病变［1］。屮医学认为VM属于“心悸…怔忡”范畴，病机中多存在气阴两虚，治疗上以益气养阴为主,多采用生脉饮进行加减治疗，其组成为人参、麦冬、五味子。生脉饮治疗VM临床疗效确切，但其干预机制尚不明确，JL临床上生脉饮是否应该早期应用一直是临床争议的问题。为此，本实验拟观察生脉饮对VM心肌细胞凋亡的影响，力求明确生脉饮的作用机制以及最佳时间，为临床准确使用提供参考。资料与方法材料：①实验动物：新生SD(Sprague-Dawlay)大鼠，1〜3口龄，由吉林大学基础医学院动物实验中心提供。②病毒株：柯萨奇B病毒试剂盒(CoxsackieVirusB3)o③实验药物：生脉饮注射液，辅酶Q10注射液，胰蛋白酶(1：250),Sigma；DMEM(dulbec'smodifiedeagle)培养基，GIBCO；胎牛血清，GIBC0；牛血清白蛋白，GIBCOo④溶液配制:缓冲液：Na2HP04?2H200.06g,K1I2PO40.06g,MgS04?7II200.20g,葡萄糖1.00g,NaCl8.00g,KC14g,CaC120.14g,三蒸水1000mLoDMEM培养液:20%胎牛血清、100U/mL青霉素、100mg/mL链霉素及谷氨酰胺。细胞消化液：由I型胶原酶20mg、胰蛋白酶18mg.牛血清白蛋白10mg.加Eagle培养基10mLo方法：①心室肌细胞培养：大鼠打开胸腔，取出心室肌，放入缓冲液中洗涤，剪取心室肌组织经胰酶37°C水浴消化10分钟...