G6PD缺乏症实验室诊断及相关研究进展王柏莲詹丹黄丽秀韦小荣[摘要]：红细胞葡萄糖～6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是一种伴性不完全显性红细胞酶缺陷病，男性半合子和女性纯合子均表现显著缺乏，女生杂合子临床表现不一，有些表现正常，有些表现显著缺乏。本文就当前G6PD缺乏症的分子机制和实验室检测方法的研究进展进行综述，对实验室选择有效和准确的检测方法提供参考。[]R730.43[文献标识码]A[]2107-2306（2020）04-246-021.引言G6PD缺乏症分布世界各地，高发区为地中海沿岸国家及东南亚地区。在我国，此病主要好发于南方地区，有南高北低特点。本病是由于G6PD基因突变所致。G6PD基因位于X染色体上，男性半合子和女性纯合子匀表现为G6PD活性缺乏显著，而女性杂合子发病与否，取决于其G6PD缺乏的细胞数量在红细胞群中所占的比例，在临床上有不同的表现，可以表现正常，中度缺乏或显著缺乏;女性杂合子表型的复杂性曾加了杂合子确诊的难度，国内外学者围绕着提高女性杂合子的检出率作了很多的研究工作，提出了一些新的方法，目前研究出简单而又能提高杂合子检出率的检测法，是临床实践迫切需要的方法。2.发病机制C6PD缺乏患者服用氧化性药物诱发溶血的机制，目前认为：G6PD在磷酸戊糖旁路代谢中是6-磷酸葡萄糖（G-6-P）轉变为6-磷酸葡萄糖酸（G-6-PD）反应中必需的酶。G6PD缺乏时，使还原三磷酸吡啶核苷（NADPH）减少，不能维持生理浓度的还原型谷胱苷肽（GSH），从而使红细胞膜蛋白中的硫基遭受氧化，破坏了红细胞膜的完整性。NADPH减少后，使高铁血红蛋白（MHb）不能转变为氧合血红蛋白，MHb增加导致红细胞内不可溶性变性珠蛋白小体（Heinzbody）形成增加，红细胞膜变硬，通过脾脏时被破坏，导致溶血。3.G6PD缺乏症分子机制G6PD基因位于X染色体长臂2区8带（Xp28），全长约18.5kb，由13个外显子和12个内含子组成，编码515个氨基酸。女性有两条X染色体，故有两个G6PD基因，两条X染色体上G6PD基因都缺乏为纯合子，表现为显著缺乏;只有一条染色体上G6PD基因缺乏为杂合子，临床表现不一。按Lyou理论，两条X染色体中只有一条在遗传上是有活性的，其中一条处于失活状态，而失活是随机的，某一细胞的一条染色体一旦失活，这个细胞的所有后代细胞中的该条X染色体均处于失活状态"。故女性G6PD缺乏杂合子，其G6PD酶活性并不是在RBC内平均分配，而是一群RBC拥有正常G6PD酶活性，另一群RBC则G6PD酶活性缺乏"。理论上，这两组RBC的数量比例应该是l：1，使得RBC总体酶水平为正常人的1/2，即属于中度缺乏状态。但不少学者认为，这两组RBC.的比例在不同个体并不保持1：1比例，这就使G6PD缺乏杂合子在临床上有不同的表现度，表型可以正常，中度缺乏或显著缺乏。故称为不完全显性遗传。男性只有一条X染色体，缺乏者为伴合子，表现为显著缺乏。4.G6PD缺乏实验室筛查方法4.1定性检测方法4.1.1高铁血红蛋白还原试验正常还原率>0.75;中间型为0.74～0.31;显著缺乏为<0.30。此方法操作简便快捷，缺点是：特异性差，存在假阳性和假阴性，结果为弱阳性时，判断容易出现主观误判，会出现模凌两可情况，且溶血标本会对结果造成影响，该方法用于新生儿筛查时假阳性偏高[3]。优点是：不需要昂贵的试剂或仪器，操作简便，可用于普查。4.1.2荧光斑点试验G6PD活性正常者10分钟内出现荧光，中间型10～30分钟出现荧光，严重缺乏30分钟仍不出现荧光。荧光斑点法优点是：敏感性和特异性较高;缺点是：操作不够快捷。4.1.3硝基四氮唑蓝纸片法（NBT法）G6PD活性正常者滤纸片呈紫蓝色，中间型呈淡蓝色，显著缺乏者呈红色。此方法简便快捷，可以检测出部分杂合子，但特异性较差响。尽管NBT纸片定性法也有过高假阳性的特点，但由于其简便的特点，容易在基层推广4.1.4G6PD/6GPD比值法C6PD/6GPD1.00为正常。4.2.1NBT定量法：其正常值为13.1～30.0BNT单位4.2.2G6PD/6PGD比值定量法：通常应用的有两种方法，一是按WHO推荐的Zinkham法，同时测定G6PD活性和6PCD活性，计算G6PD/6PGD比值;二二是分别以6PG和G6P作为底物，用NBT定量法分别测定G6PD活性和6PGD的活性，计算G6PD/6PGD比值。其正常值为：WHO推荐法：G6PD/6PGD>0.95;NBT法：G6PD...