胃肠外科术后肠道细菌移位的临床研究【摘要】目的：探讨胃肠外科手术后肠黏膜屏障损伤与肠道细菌移位(BT)及BT与感染并发症之间的关系。方法：34例择期胃肠外科手术患者，于术前2h和术后2、24、48h釆集外周血,进行全血细菌DNA、血D-乳酸、内毒索(LPS)浓度检测及血细菌培养。观察患者30天以监测感染并发症情况。结果：术前PCR检测全血细菌DNA均为阴性，术后共有7例阳性。术后出现全身炎症反应综合征(SIRS)的患者PCR阳性率为38-9%,无SIRS组为0%(P<0•01)oPCR阳性组SIRS发生率为100%,阴性组为40•7%(P<0•01)。PCR阳性者85•7%发生感染并发症，阴性者无一发生(P<001)。术后血细菌培养阳性率5%,£显著低于PCR的检测结果(20%,£P<0-01)；血培养阳性者，PCR检测均呈阳性。PCR阳性结果中大肠杆菌DNA占71•4%。PCR阳性的患者外周血血浆D-乳酸及LPS浓度较PCR阴性者明显升高(P<0-01),且二者呈显著正相关(r=0-89,P〈0・01)。结论：胃肠外科术后肠黏膜屏障损伤与BT关系密切，术后早期(2h)即可发生BT,以大肠杆菌为主，术后SIRS和感染并发症与BT密切相关。【关键词】外科手术；细菌移位；聚合酶链反应；乳酸；内毒素类【中图分类号】R656【文献标识码】A【文章编号］1004—7484(2013)11—0185—02胃肠外科手术与其他创伤性较大的手术一样，可引起肠黏膜屏障损害，其与术后肠道细菌移位(bactari-altranslocation,BT)及感染并发症的联系值得临床关注。但目前临床上用以判断肠黏膜屏障损伤及BT的指标与方法或可行性差，或阳性率很低。本研究应用外周血D-乳酸浓度判断肠黏膜通透性，用PCR方法动态检测血中细菌DNA判断BT的情况，探讨胃肠外科手术后肠黏膜屏障损伤、BT与感染并发症之间的关系。1资料与方法1・1研究对象大中型择期胃肠外科手术34例（胃癌根治12例，小肠部分切除3例，结肠癌根治5例，直肠癌前切除6例，经腹会阴联合直肠癌根治4例，胰十二指肠切除4例），男性20例，女性14例，平均年龄43.4（34〜68）岁。术前有严重全身性疾病、脏器功能障碍及严重并发症的患者不列入本研究。术前准备按常规进行。分别于术前2h和术后2、24、48h在严格无菌条件下抽取肘静脉血10ml进行检测。术后观察30天以了解全身炎症反应综合征及感染并发症的发生情况。1.2检测指标引物设计：采用靶基因为大肠杆菌特异性B半乳糖昔酶基因的BG-l、BG-4（扩增产物长度762bp）和所有细菌共有的16SrRNA基因的高度保守区引物16SrRNA+、16SrRNA-（扩增产物长度798bp）o用细菌基因组DNA提取试剂盒（天为时代公司）提取纯菌及全血DNA进行PCR扩增，用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。检测指标包括：①血细菌培养：在采血行全血细菌DNA检测的同时采血以常规方法做需氧菌及厌氧菌培养；②血浆D-乳酸检测：血浆经高氯酸去蛋白后，用酶学分光光度法检测[1];③血浆内毒素（LPS）检测：采用改良过氯酸法预处理血浆、偶氮显色法蛍试验（LAL）定量测定血浆内毒索浓度。1・3术后观察指标术后观察有无SIRS及感染并发症，包括切口、腹腔、肺部感染等。具备以下2项或2项以上休征可诊断SIRS：体温>38°C或90/min；呼吸频率〉20/min或PaC0212-0X109/L或0•10。1•4统计学处理采用Stata软件进行数据分析，计数资料采用x2检验，计量资料采用t检验及ANOVA分析。2结果2.1一般情况术前PCR检测全血细菌DNA均为阴性，术后共有7例阳性。2例术中发生低血压(持续10~20min)者术后PCR检测均呈阳性。2.2全血细菌DNA和细菌培养术后血细菌培养阳性共2例(1株大肠杆菌，1株金黄色葡萄球菌，未检出厌氧菌)，阳性率为5-9%(2/34),明显低于PCR的阳性率(20•6%,P〈0・01)。血细菌培养阳性者,PCR结果均阳性。PCR阳性结果中大肠杆菌DNA占71-4%(5/7)o2.3术后SIRS和感染并发症术后出现SIRS的患者PCR阳性率为38•9%(7/18),显著高于无SIRS组(0%,P<0•01,)。PCR阳性组SIRS发生率100%,阴性组为40-7%,差异有显著性意义(P<0-01)o发生术后感染者共6例，7个部位。PCR阳性组感染并发症发生率为85-7%(6/7),阴性组均未发生感染(0/27),二者差异有显著性意义(P<0-01)o感染患者PCR检测均为阳性，最常见的感染部位为肺(3例)、腹腔(3例)，其次为切口(1例)。2.4血浆D-乳酸及LPS水平术后2h外周血血浆D...