辛萸散中阿魏酸含量测定方法研究俞伟杨海玲周海滨周燕萍丁捷飞(宁波立华制药有限公司浙江宁波315174)【摘要】目的：建立辛萸散中阿魏酸含量的反相高效液相色谱法。方法：色谱柱为依利特Hypersil0DS2C18(250mm×4.6mm,5μm)；流动相：以甲醇・2%冰醋酸溶液(20:80)；柱温为38°C；流速为l.Oml/min；检测波长为323nmo结果：阿魏酸浓度在5.14〜164.48μg/ml,范围内与峰面积呈良好线性关系(&0.9999),平均回收率为98.27%,RSD为0.57%(n=6)o结论：该方法简便、灵敏、准确、专属性强、重现性好，为产品的质量标准研究提供了理论依据。【关键词】辛萸散；阿魏酸；高效液相色谱法；含量测定【中图分类号】R927.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752(2016)15-0350-02eterminationofFerulicAcidinxinyipulvisYuWei,YangHailing’ZhouHaibin’ZhouYanpingQngJiefeiNingboliwahpharmaceuticalco.,ltd.,Ningbo’Zhejiang,China315174[Abstract]ObjectiveToestablishtheRP-HPLCmethodforFerulicAcidinxinyipulvis.MethodsThedeterminationwascarriedoutusingtheHypersilODS2C18(250mm×4.6mm,5μm),withthemobilephaseofMethanol・2%glacialaceticacidsolution(20:80),Thecolumntemperaturewas38°C,Theflowratewasl.Oml/minandthedetectionwavelengthwasat323nm.ResultsFerulicacidconcentrationin5.14^164.48μg/ml,Thelinearrelationshipbetweentherangeandthepeakareawaslinear(r=0.9999).Averagerecoveryratewas98.27%,RSD=0.57%(n二6).ConclusionThismethodissimple,sensitiveandaccuratewithstrongspecificityandgoodreproducibility,whichprovidesthetheoreticalbasisforthestudyofthequalitystandardofthisproduct.【Keywords]Xinyipulvis;FerulicAcid;HPLC;Contentdetermination辛萸散，源于《重订严氏济生方》，由辛夷、白芷、升麻、木通、甘草、槁本、防风、川茸、细辛组成，主治肺虚，风寒湿邪外袭，鼻内壅塞，涕出不已,气息不通，或不闻香臭。有关测定阿魏酸含量的文献很多[2-8],但测定辛萸散中阿魏酸含量尚未见报道。为此，本试验中采用简捷、方便的前处理方法，以反相高效液相色谱（RP・HPLC）法测定辛黄散中阿魏酸含量，并对测定方法进行方法学考察。现报道如下。1•仪器与试药Agilentl200高效液相色谱仪、HWS-28双列八孔恒温水浴锅（上海慧泰仪器制造有限公司）；甲醇为色谱纯，冰醋酸、甲酸、乙醇为分析纯，水为超纯水；阿魏酸对照品（批号：110773-201313,中国食品药品检定研究院）；辛萸散（批号：HK140301>HK140302、HK140303）由宁波立华制药有限公司生产。2.方法与结果2.1色谱条件色谱柱：依利特HypersilODS2C18（250mm×4.6mm,5μm）；流动相：以甲醇・2%冰醋酸溶液（20:80）为流动相；波长为323nm；流速为l.Oml/min；柱温为38°C。2.2溶液制备2.2.1对照品溶液的制备：取阿魏酸对照品适量，精密称定，加45%乙醇■冰醋酸（20:1）混合溶液制成每lml含20?g的溶液,即得。2.2.2供试品溶液的制备：取样品适量，研细，取约2.0g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入45%乙醇■冰醋酸（20:1）混合溶液25mL,密塞，称定重量，超声处理（功率300W,频率50KHZ）30分钟，放冷，再称定重量，用45%乙醇■冰醋酸（20:1）混合溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液，即得。2.2.3阴性对照品溶液的制备：依据处方比例，按供试品溶液制备方法制备辛萸散缺少川茸、槁本、升麻、羌活的阴性对照品溶液。2.3方法学考察231专属性试验:精密吸取对照品溶液、阴性对照溶液、供试品溶液各10?1,注入高效液相色谱仪，记录色谱图。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于8000,分离度在1.5以上，结果阴性对照品溶液色谱中无阿魏酸色谱峰，说明测定无干扰(见图l)o2.3.2线性关系考察：依法制备对照品溶液，分别配制成浓度为5.14?g/mK10.28?g/mk20.56?g/ml>41.12?g/mk82.24?g/mk164.48?g/ml的对照品溶液，进量样10μl,测定阿魏酸的峰面积，以峰面积为纵坐标(Y),浓度为横坐标(X),绘制标准曲线，计算冋归方程Y=37.344X+33.112,R2=0.9999(n=6)o结果表明：阿魏酸浓度在5.14...