S100A8在乳腺癌表达的病理学研究孙小年胡丹妮卢雪琳王江涛李晶---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除------本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除------本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---摘要：目的：分析S100-A8在乳腺癌表达及与乳腺癌临床病理和生存状况的关系。方法：用免疫组织化学方法检测S100-A8蛋白在乳腺良性疾病（n=15）及乳腺癌无淋巴结转移组（n=83）及109例有腋窝淋巴结转移乳腺癌和配对淋巴结转移灶中的表达，进行Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析。结果：S100-A8蛋白在乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶之间存在差异表达，原发癌组织和配对的转移性淋巴结之间差异有统计学意义。Kaplan-Meier生存分析和Cox回归模型提示组织学分级和淋巴结状态是乳腺癌的危险因素。结论：S100-A8蛋白与乳腺癌淋巴结转移相关，并与ER表达水平和组织学类型有关。关键词：乳腺癌；S100-A8；淋巴结转移；免疫组化方法：R737.9文献标志码：A：1008-2409（2016）05-0036-04乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤和女性癌症死亡的第二大原因。乳腺癌在西方國家发病率和病死率高，而其发病率在发展中国家呈上升趋势。S100家族蛋白是脊椎动物特有的分子量为10～20kDa的小酸性蛋白质，可以与钙离子以同型二聚体或低聚物形式结合。许多研究已经描述了这些蛋白质与炎症和癌症的关系。至少有16个编码S100家族成员的基因，包括S100-A8基因，聚集在人类染色体lq21，在肿瘤的发生发展中这个区域经常出现染色体重排，并与肿瘤细胞的增殖和转移相关。笔者对S100-A8在乳腺癌中的表达及临床病理学意义进行了初步研究。现报告如下。1资料与方法1.1病例资料选择1996年5月至2008年5月在湖南省肿瘤医院就诊207例女性乳腺疾病患者的石蜡组织样本。其中15例诊断为乳腺良性疾病包括乳腺纤维囊性改变、不典型增生和纤维腺瘤，83例诊断为无区域淋巴结转移乳腺癌，109例有腋窝淋巴结转移乳腺癌和配对淋巴结转移灶。所有乳腺癌患者均经湖南省肿瘤医院病理确诊，术前均未接受放疗或化疗。原发性肿瘤患者的平均年龄为45岁（30～73岁），平均总生存时间约为80.07个月。组织标本用10%甲醛固定液，石蜡包埋，4μm厚切片。所有病理切片均由湖南肿瘤医院病理科两位有经验的病理医生观察，均为浸润性导管癌和浸润性小叶癌。分为4组检测S100-A8蛋白的表达：①乳腺良性疾病（BBD）。②无淋巴结转移的乳腺癌原发灶（NMBT）。③有淋巴结转移的乳腺癌原发灶（PBT）。④配对的淋巴结转移灶（PMLN）。1.2试剂兔单克隆免疫球蛋白（IgG）抗体S100-A8购自Abcam公司（英国）。柠檬酸抗原修复液（粉）（0.01M，pH：6，mvs-0066），0.01MPBS（pH：7.2～7.4）。DAB显色试剂盒（聚合物kit-0015）和ElivisionTMplusPolyerHRP试剂---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---盒（大鼠和家兔）kit-9902（迈新生物技术产品，福建）。家用微波炉（格兰仕）对微波抗原修复。1.3免疫组化方法石蜡切片在烤箱烤60℃2h，然后依次在二甲苯中脱蜡、梯度乙醇洗涤、流水清洗，柠檬酸抗原修复液中微波修复20min。3%过氧化氢孵育15min，非免疫血清封闭。滴加S100-A8抗体（1：200）4℃过夜。孵育链霉亲和素一过氧化物酶15min，然后过氧化物酶标记二抗孵育15min后，DAB显色。1.4免疫组化染色结果评分免疫组化染色结果判断由两位高年资病理医生进行，将结果进行比对，对不一致的结果将重验并达到一致。总的免疫组化染色评分（totalimmuno-stainingscore，TIS）综合染色比例和强度进行。1.5统计学分析应用Wilcosonsigned-rank检验和MeNemar检验分析S100-A8各组乳腺病变中的表达差异。使用X2检验分析S100-A8表达与临床病理指标间的关系。Kaplan-Meier法分析S100-A8阳性和阴性乳腺癌患者的生存状态，MultivariatCox风险分析$100-A8在乳腺癌预后中的作用。P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1S100-A8在各组乳腺病变组织中表达免疫组化结果显示S100-A8阳性着色位于细胞质。阳性表达率在BBD、NMBT、PBT、PMLN分别为13.3%（2/15）、37.3%（...