园艺学报，（）：–2014411223832392wwahs.acActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126收稿日期：2014–08–19；修回日期：2014–11–14基金项目：广西自然科学基金项目（2013GXNSFDA019011，2014GXNSFBA118102）；广西高校科研项目（YB2014009）；广西大学科研基金项目（XBZ120766）*共同第一作者M杧果低分子量热激蛋白基因iHSP17.6的克隆及表达分析CANVanToan1,3,*，罗聪1,*，董龙1，刘召亮1，何新华1,2,**（1广西大学农学院，南宁530004；2广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁530007；3北江农林大学林业系，越南北江）摘要：采用RT-PCR与RACE相结合的方法获得了杧果低分子量热激蛋白基因的cDNA全长序列，命名为MiHSP17.6，GenBank登录号为KJ459857。序列分析显示，该基因序列全长为680bp，其中开放阅读框为462bp，编码154个氨基酸，5′非编码区和3′非编码区长度分别为80bp和135bp。杧果MiHSP17.6与其他物种的低分子量热激蛋白同源性介于74%~82%。实时荧光定量分析表明，MiHSP17.6在‘四季杧’不同组织器官中均表达，在果实发育的中期表达水平持续上升。高温（44℃）、低温（4℃）、盐（NaCl）、聚乙二醇（PEG）、脱落酸（ABA）、双氧水（H2O2）和水杨酸（SA）处理均诱导该基因表达，因此推测MiHSP17.6的功能可能与杧果果实发育和抵御逆境胁迫相关。关键词：杧果；MiHSP17.6；克隆；表达分析：S667.7文献标志码：A：0513-353X（2014）12-2383-10CloningandExpressionAnalysisofaSmallHeatShockProteinGene（MiHSP17.6）fromMangiferaindicaCANVanToan1,3,*，LUOCong1,*，DONGLong1，LIUZhao-liang1，andHEXin-hua1,2,**（1AgriculturalCollege，GuangxiUniversity，Nanning530004，China；2GuangxiCropGeneticImprovementandBiotechnologyLaboratory，Nanning530007，China；3BacgiangAgriculturalandForestryUniversity，Bacgiang，Vietnam）Abstract：ThefulllengthsequenceofcDNA，smallheatshockprotein17.6geneofmangowas---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---clonedbyRT-PCRandRACEmethod，whichwasnamedMiHSP17.6withtheGenBankaccessionnumberofKJ459857.Theresultsshowedthatthefull-lengthsequenceofMiHSP17.6is680bpandtheopenreadingframeis462bp，whichencodingapolypeptideof154aminoacids.Theuntranslatedregion（UTR）5′and3′withthelengthof80bpand135bp，respectivelyparisonoftheaminoacidssequencesofhomologousHSPproteinsfromotherspeciesindicatedthatMiHSP17.6hasarangeof74%to82%identity.Thereal-timequantitativePCRresultsshowedthatMiHSP17.6wasexpressedinalltestedorgans.AndwealsofoundthatMiHSP17.6wasregulatedbyseveraltreatments，suchashightemperature（44℃），lowtemperature（4℃），salt（NaCl），polyethyleneglycol（PEG），abscisicacid（ABA），hydrogen**通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：honest66222@163；Tel：15177169189）---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---2384园艺学报41卷peroxide（H2O2）andsalicylicacid（SA）treatments.TheseresultsshowedthatthefunctionofMiHSP17.6genehasanimportantroleinmangofruitdevelopmentandstressresponses.Keywords：Mangiferaindica；MiHSP17.6；cloning；expressionanalysis热激蛋白（Heatshockproteins，HSP）根据其分子量的大小又分为HSP100s、HSP90s、HSP70s、HSP60s和sHSP（低分子量HSP，smallHSP）5类。这是一类非常保守的蛋白质家族，在不同物种中同一类型的热激蛋白具有很高的同源性，但同一物种中不同类型的热激蛋白之间无同源性。热激蛋白不仅可以稳定细胞的结构，保持细胞正常的功能，使生物体能够抵御不利的环境胁迫（方丽平和李进步，2007；邹杰等，2007）。目前研究表明，热激蛋白基因不仅在高温胁迫下被诱导表达，在盐、干旱、重金属、低温等不利条件下同样可以被诱导表达（Vierling，1991；裴华丽，2007；Vásquez-Robinetetal.，2010；Yeetal.，2012）。低...