自体表皮细胞悬液促进大鼠III度烧伤创面愈合效果研究［摘要］目的：探讨自体表皮细胞悬液促进III度烧伤创面愈合的机制。方法：应用切削皮法结合胰蛋白酶技术获得自体表皮细胞悬液，皮下注射到III度烧伤创面基底后观察大鼠III度创面愈合率和创面愈合效果。结果：实验组自体表皮细胞悬液制作整个过程约lh内即可完成。实验组2和3周创面愈合率明显高于对照组（P〈0.01,P<0.05）o实验组4周创面愈合后颜色和质地均明显优于对照组（P〈0.05）。结论：改进的自体表皮细胞悬液技术可操作性强，具有快速、简便、经济等优点，是治疗III度烧伤创面的良好方法，其主要机制是表皮细胞去分化促进皮岛形成。［关键词］表皮细胞；悬液；细胞活力；三度烧伤；表皮去分化［中图分类号1R644［文献标识码］A［文章编号11008-6455（2014）23-1978-03Abstract：ObjectiveToinvestigatethemechanismofimprovedepidermalcellsuspensiontotreatfull-thicknessdegreeburns.MethodsEpidermalcellsuspensionwasmadewithanimprovedmethod.Thecurerateandqualityafterepidermalcellbeinginjectedwereevaluatedinratswithfull----本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---thicknessdegreeburns.30ratsweredividedintocontrolandtherapygroups.Eachgroupincludes15rats・ResultsIttookonehourtoacquireepidermalcellsuspension.Curerateoftherapygroupat2and3weekswassignificantlyhigherthanthatofcontrolgroup(P<0.01,P<0.05).Thequalityofskinintherapygroupwasalsosignificantlybetterthanthatofcontrolgroupat4weeks(P〈0.05).ConclusionItisasimple,easyandeconomicalwaytoacquireepidermalcellsuspension.Full-thicknessburnsofratscouldbehealedwithit.Keywords:epidermalcell；suspension；cellviability；full-thicknessdegreeburns；epidermaldedifferentiation自异体表皮移植技术成功挽救了大量烧伤及皮肤缺损患者，但是大面积深度烧伤患者的供皮区有限问题，以及供皮区感染、瘢痕和色素异常等并发症迫使临床医生不断寻找新方法，从而能够以较小的供皮区修复较大的创面，并减少供皮区并发症。1975年培养自体表皮细胞获得成功是一个重要突破，已经在临床得到应用[1-5]o因为传统的培养自体表皮细胞技术需要专业的实验室，存在操作复杂和价格昂贵的缺点，并且细胞培养还需要有一定的时间延后，因此临床应用尚不满意。而异体表皮移植，由于免疫排斥反应存在，只能作为暂时封闭创面的一种方法，加上伦理问题日渐突出导致异体皮来源紧张，价格不断升高，使得其临床应用日益受限。值得注意的是近年来，未培养---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---的自体表皮细胞悬液技术得到了快速发展，成为国内外研究的热点[4-9]o本研究采用改进方法制取自体表皮细胞悬液，观察到其促进大鼠III度烧伤创面愈合。1材料和方法1.1动物分组与烧伤模型制作：健康Wistar大鼠30只，雌雄各半，200〜300g,随机分为对照组和实验组，每组15只。大鼠术前禁食6h,腹部皮肤消毒后，10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉。剔除背部鼠毛，在脊柱两侧充分。951热水直接倾倒于无毛区内实验区，时间约15s,造成III度烧伤模型。伤后lOmin,生理盐水10ml腹腔注射。单笼饲养，每日伤口清洁消毒，每日予氨节青霉素4万单位肌注。对照组和实验组每只大鼠背部正中线两侧形成2个创面分别为取皮区和实验区(III度创面)。烧伤后第4天，全麻下行三度创面切痂术，直至深筋膜浅层，彻底止血后，5ml注射器经创缘正常皮肤下注射自体表皮细胞悬液到创面基底，无菌凡士林油纱及敷料包扎[10]O1.2自体表皮细胞悬液的制备：大鼠背部取皮区碘伏常规消毒3次，设计切取皮片范围l.OcmX1.0cm,皮下注射生理盐水使供皮区皮肤明显肿胀并形成一个相对的平面，取无菌一次性剃须刀片，中号直血管钳夹刀片，切下表皮，取皮片的厚度在切削时应密切观察。或者槻轴取皮刀切取刃厚皮片，取下的皮片立即放于生理盐水浸洗3遍备用，供皮区创面用无菌凡士林油纱及敷料加压包扎。无菌条件下，将浸洗后皮片放入无菌容...