儿童细菌性痢疾志贺氏菌属血清型分布及耐药性分析儿童细菌性痢疾志贺氏菌属血清型分布及耐药性分析摘要：目的：了解儿童感染细菌性痢疾志贺氏菌属的血淸型分布及耐药性，提供临床合理使用抗生素的信息。方法：对每日的粪便标本进行分离培养；对疑似志贺氏菌属的菌株用微量生化鉴定管进行生化鉴定，再用志贺氏菌属多价诊断血清进一步鉴定分群；药敏试验采用纸片扩散法，最后对药敏结果进行分析。结果：儿童肠道细菌性痢疾福氏志贺氏菌占77.2%,宋内氏志贺氏菌占22.8%o关键词：志贺氏菌属血清型分布耐药性Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.01.024【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号11671-8801(2014)01-0019-011资料与方法1.1材料。79株志贺氏菌株均分离来自金乡县人民医院2012年6月〜2013年5月儿科门诊及儿科住院患儿粪便标本。1.2实验方法。烧灼接种环，待冷，沾取粪便中的粘液脓血部分，在SS培养基上三区划线分离标本。划线完毕在培养Ill!底玻璃上用记号笔注明接种患者的病案号及接种日期。37°C孵育18-24小时，取岀,观察琼脂平板表面生长的各种菌落，注意其大小，形状，边缘，表面结构，透明度，颜色等形状。1・3鉴別实验。右手执灭菌并冷却的接种针挑取圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐的菌落[1];左手握持待接种的克氏双糖管，右手小指与无名指拔取并夹持棉塞，管口迅速通过火焰灭菌，将占有细菌的接种针自管斜面底部轻轻向顶端拖一条接种线，再自下而上地蜿蜒划线涂布。再垂直刺入半固体琼脂培养基的中心，可刺达近管底处，但不及于管底，然后循原路退出。勿触破培养基表面，沾菌的接种针进出试管时，均不宜触及试管内壁。接种完毕，重新灼烧接种针灭菌后放下，试管口迅速通过火焰2-3次，塞冋棉塞，转进至原来位置。37°C孵育18-24小时后观察生长情况［2］o1・4牛化鉴定。最后查阅肠杆菌科细菌工化鉴定编码册进行鉴定。培养管包括葡萄糖、赖氨酸、鸟氨酸、赖氨酸对照管、硫化氢、蛋口月东水（靛基质试验用）、乳糖、卫矛醇、苯丙氨酸、尿素、西蒙氏枸椽酸盐。L5血清学试验。挑取生化鉴定为志贺氏菌的单个菌落，先用属诊断血清中的4种多价血清做血清玻片凝集试验，同时做牛理盐水对照试验。因为我国志贺氏菌以福氏志贺菌和宋内氏志贺菌常见，所以试验再往下进行时优先考虑用D群血清、B群多价血清做玻片凝集。D群血清凝集者即可确定为宋内氏志贺菌，B群血清凝集者即可确定为福氏志贺菌［3］。1・6药敏试验。涂布法贴药敏纸片，各纸片中心相距＞24mm,纸片距平板内缘应＞15mm,置37°C培养18h-24后，用游标卡尺测量各个药敏纸片的抑菌环直径。大肠埃希氏菌质控菌株与检测菌在同…条件下做药敏试验，标准菌株的抑菌环直径均在预期范围内，参照纸片法药敏试验纸片含药量和结果解释以及MIC测定结果解释，对试验结果进行判断。2结果2.1菌种类型。79株志贺氏菌株经生化鉴定和血清分群，分为两个血清群（如表l）o福氏志贺氏菌（B群）61株，占77.2%；宋内氏志贺氏菌（D群）18株，占22.8%；未检出鲍氏志贺菌（C群）和痢疾志贺菌（A群）。2.2药敏结果。福氏和宋内氏志贺氏菌对抗生素的耐药性是不同的，宋内氏志贺氏菌对头鞄曲松、头抱毗月亏、安曲南、哌拉西林/他卩坐巴坦的耐药高于福氏志贺氏菌，福氏志贺氏菌对氨节西林/舒巴坦、左氧氟沙星、环丙沙星、头抱哌酮/舒巴坦的耐药性高于宋内氏志贺氏菌；二者对氨节西林的耐药率已达100%,复方新诺明仅次Z,已成多重耐药模式；锻未发现对亚胺培南的耐药株。药敏结果显示，志贺氏菌对多种抗生素耐药。从本次资料可以看出，三四代头抱菌素和B-内酰胺酶抑制剂类药物对志贺氏菌引起的痢疾有很好的治疗作用，临床用药应根据具体药敏试验结果而定。痢疾杆菌对多种抗生素耐药性逐渐增加，而且同一菌株可对多种药物耐药冃H趋严重。这主要与细菌间存在耐药因子(R因子)不断相互传递有关。R因子由DNA组成，具有自主复制能力。其携带的耐药基因可指导药物灭活酶的合成。R因了耐药机制主要是使痢疾杆菌产生和加强破坏抗生素药物的酶系统，可在体内外以及细菌种内外Z间进行传递［5］。志贺氏菌日益增长的耐药性使得发展痢疾菌苗成为必然。...