一株冬虫夏草菌的鉴定及其抗氧化特性研究丁浩安超薛文娇摘要：对分离自野生冬虫夏草（Cordycepssinensis）的一株真菌F4539进行形态学和分子生物学鉴定，并对其发酵产物进行抗氧化活性研究。结果表明，F4539（Genbank号为KU359775）与Hirsutellasinensis（AJ309355）具有99%的相似性，初步确认F4539为中华被毛孢（Hirsutellasinensis）。抗氧化活性试验结果表明，F4539发酵物20g/L乙醇提取液的DPPH抗氧化活性为75.39%，高于同浓度国产某商品化冬虫夏草菌菌丝体胶囊乙醇提取物的抗氧化活性，进一步研究表明，F4395发酵物和国产某商品清除DPPH自由基的IC50分别为5.96g/L和11.61g/L，即F4539发酵提取物清除DPPH自由基的能力强于国产某商品。关键词：冬虫夏草（Cordycepssinensis）；中华被毛孢（Hirsutellasinensis）；抗氧化：S567.3+5：A：0439-8114（2019）03-0057-04DOI：10.14088/jki.issn0439-8114.2019.03.016开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Abstract：AfungusnumberedF4539wasisolatedfromwildCordycepssinensisandidentifiedbymorphologyandmolecularbiologicalidentification，inaddition，theantioxidantactivityforthefermentationproductswerestudied.TheresultsdemonstratedthatF4539（Genbank：KU359775）hadrelativelyhighsimilarityinevolutionwithHirsutellasinensis（AJ309355），itwasconfirmedthatF4539wasHirsutellasinensis；AntioxidantactivitytestsshowedthattheDPPHantioxidantactivitywas75.39%withaconcentrationof20g/LethanolextractfromF4539fermentationproducts，whichwashigherthanthesameconcentrationofethanolextractsfromthecertaincommercialCordycepssinensismyceliumcapsule.FurtherresearchshowedthattheIC50ofF4539fermentationproductsandcommercialCordycepssinensismyceliumcapsulewere5.96g/Land11.61g/Lrespectively.ItwasshownthattheantioxidantactivitywashigherinF4539fermentationproductsthanthecommercialCordycepssinensismyceliumcapsule.Keywords：Cordycepssinensis；Hirsutellasinensis；antioxidant冬虫夏草（Cordycepssinensis）隶属麦角菌科虫草属，是鳞翅目蝙蝠蛾科蝠蛾屬幼虫被中华被毛孢（Hirsutellasinensis）寄生后形成的虫菌复合体，为中国的珍贵中药材之一，具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等功效[1]。它分布于中国青藏高原的西藏、青海、四川、甘肃和云南等地以及印度、尼泊尔和不丹等国的部分地区。主产于西藏的那曲、林芝、昌都地区，青海的玉树、果洛州一带，四川的阿坝州、甘孜州，云南迪庆州德钦、中旬以北一带以及甘肃省甘南州玛曲以西等地。由于野生冬虫夏草分布地区狭窄、自然寄生率低、对生活环境条件要求苛刻，所以本身资源比较有限，再加上自然因素（如天气干旱、气候变暖等），天然资源日益匮乏。近年来由于冬虫夏草主产地生态环境遭到人为破坏，大量盲目不合理采挖致使资源日趋减少，产量逐年下降，导致天然冬虫夏草的价格昂贵，自20世纪以来，人们开始探索用人工方法培育仿冬虫夏草。迄今为止，深层发酵研究已取得了较大的进展，且生产出的替代品（如菌丝体）的成分和药效也与天然虫草相似[2]。中华被毛孢已经被证实为冬虫夏草的无性型[3，4]。由于冬虫夏草的全人工培养技术尚未成熟，现阶段人们采用发酵冬虫夏草菌无性型中华被毛孢，通过提取菌丝活性成分替代天然冬虫夏草的药用价值，而由于此前关于冬虫夏草无性型的争议，导致多数研究冬虫夏草菌的发酵试验中的菌种不是中华被毛孢。因此，在通过发酵法生产冬虫夏草替代品的产业化前进行菌株的筛选、鉴定及生物活性测定非常重要。本试验对前期分离自野生冬虫夏草的一株真菌F4539进行了形态学和分子生物学鉴定，结果表明其为中华被毛孢，同时研究了其发酵产物的抗菌和抗氧化活性，旨在为进一步产业化的开发提供理论依据。1材料与方法1.1材料与试剂F4539菌株，从野生冬虫夏草中分离选育获得，在-80℃超低温冰箱保存。活化培养基：蔗糖50g/L，胰蛋白胨10g/L，酵母粉3g/L，无水氯化钙0.3g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，七水硫酸镁0.5g/L，氯化...