双酚A致雄性小鼠生殖毒性的研宄长沙医学院湖南长沙410219【摘要】目的：探讨不同剂量双酚A(bisPhendA,BPA＞对雄性小鼠的生殖毒性的影响。方法：选取健康雄性小鼠，采用灌胃染毒，染毒4周后颈椎脱臼处死，观察精子形态，精子畸形率，精子活度，睾丸切片。结果：双酚A实验组，其中附睾脏器系数，精子畸形率，精子活度指标随着剂量的升高而呈正相关，具有一定的对比性。HE染色得山结果显示双酚A实验组小鼠附睾有损伤，生精小管山现坏死。结论：一定剂量的双酚A对雄性小鼠精子有生殖毒性。【关键词】BPA;生殖毒性；雄性小鼠【】R114【文献标识码】A【】2096-0867(2016)-2-067-02双酚A(bisphendA,BPA｝是一种酚类有机物,水中溶解度为120-300mg/L,具有难挥发性和疏水性，易溶于醇和酮。H常生活中人们可以通过饮食摄入、灰尘吸入和皮肤接触BPA［l-2］。在人的血液、尿液、胎盘、乳汁、羊水及其他体液等组织中能检测到BPA［3］。BPA是一种环境内分泌干扰物［4］,能够模拟雌激素的作用，与雌激素受体结合，干扰体内天然激素的正常活动，即使是极低剂量也能对生物体的生殖、神经、免疫等功能产生影响［5-6］。木实验旨在通过研究BPA对雄性小鼠的牛.殖毒性，试分析BPA致雄性小鼠生殖毒性的量-效关系，探讨BPA致雄性小鼠生殖毒性可能的作用机制。1材料与方法1.1仪器与设备BPA,分析纯，中国上海化工试剂公司，生产编号B108652;玉米油，药用级，中国上海化工试剂公司，生产编号C116025;显微镜(Unican)HV2818,生产编号30108453；电子分析天平(梅特勒一托利多仪器上海有限公司)。1.2实验动物选用湖南省疾控实验动物中心提供的普通级封闭群，KM群雄性小鼠,体重18g到22g，随机分成对照组，BPA低剂量组、BPA高剂量组。分别记为C组，B低剂量组、B高剂量组，每组3只动物，对照组采用玉米油做空白对照，BAF低组染毒剂量为50mg/kgBW,BAF高组剂量为200mg/kgBW。1.3实验方法1.3.1形态学观察计算精子活动率、精子畸形率。精子活动率：采用伊红染色法，将0.5g伊红丫染料溶于lOOmL等渗盐水中配成染色液。计数100条精子，计数的精子所占比例即为精子活动率。精子活动率=活精子数/100精子畸形率：取一侧附睾置于5mL生理盐水中，剪碎，37°C孵育15-20min后，制得精子悬液。每只动物检查1000只精子，计算精子畸形率。畸形率=畸形精子数/10001.3.2脏器系数迅速取出实验小鼠睾丸和附睾，去除周围的脂肪组织和结缔组织，准确称量小鼠双侧睾丸和附睾的重量。脏器系数(％)=脏器体重(g)/小鼠体重(g)100%1.3.3形态学观察常规HE染色，石蜡切片，光学显微镜观察。以上睾丸病理学染色、切片、拍照和读片将在长沙医学院病理学教研室老师指导下完成。1.4统计方法所有实验数据均应用SPSS18.0统计软件录入分析，实验组和对照组数据采用方差分析和LSD法进行比较。2结果2.1一般情况染毒后，低剂量小组实验小鼠体重奋上升，高剂量组小鼠出现活动量减少，精神蒌靡，进食量也有不同程度减少，停止染毒后逐渐好转；整个实验过程中高剂量组小鼠死亡1只。2.2BPA染毒对成年雄性小鼠精子畸形率，精子活度的影响BPA染毒各组小鼠的精子活动率与对照组比较奋显著性差异(P《0.05),精子畸形率与对照组比较有显著性差异(P《0.05＞，附睾的脏器系数与对照组比较有显著性差异(P《0.05)，结果见下表。表BAF染毒对精子活动率，精子畸形率，睾丸附睾脏器系数的影响(plusmn;s)2.3BPA对成年雄性小鼠睾丸组织的影响通过石蜡切片结果显示：C组结构清晰的呈圆形或椭圆形的生精管，管壁内有不同发育阶段的生精细胞，以及多数成熟精子，与生精细胞紧密相贴。睾丸及间质无胞壁脱落、坏死、钙化或精子肉芽肿，为正常辜丸组织结构。B低剂量组小鼠，主要改变冇生精细胞脱离基底部向管腔部移动，成熟精子减少，少数曲细精管上皮细胞排列紊乱，少数上皮与基底部分离。B高剂量组改变可见曲细精管上皮细胞排列紊乱，少数上皮与基底部分离管腔内可见脱落的生精细胞。部分生精管内已经完全变性坏死，一些支持细胞与生精细胞呈分离状，生精细胞减少较明显。综上所述随着BPA染毒剂量的增高，生精小管胞壁以及生精小管损伤加深，甚至出现生精小管变性坏死现象。BPA通过对成熟...