七星瓢虫乙酰辅酶A羧化酶基因克隆及表达分析向梅谢应强张洪志李玉艳王孟卿臧连生张礼生---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除------本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除------本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---摘要：乙酰輔酶A羧化酶（acetyl-CoAcarboxylase，ACC）是脂肪酸合成第一步反应的限速酶，参与长链脂肪酸的合成。本试验基于七星瓢虫CoccinellaseptempunctataL.转录组数据，探究ACC在滞育七星瓢虫脂代谢中的调控作用。利用RT-PCR和RACE技术从七星瓢虫中克隆得到ACC基因全长，命名为CsACC（GenBank登录号：MT012819），该基因cDNA序列全长7217bp，开放阅读框（ORF）长为6792bp，编码2263个氨基酸，预测蛋白质分子量为255.9kDa，理论等电点（pI）为5.90，无跨膜螺旋结构，无信号肽。通过氨基酸多序列比对分析，结果显示CsACC与鞘翅目的赤拟谷盗Triboliumcastaneum乙酰辅酶A羧化酶同源性较高。利用实时荧光定量PCR技术检测CsACC基因在---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---七星瓢虫正常发育及滞育诱导不同阶段的相对表达量，结果显示，滞育诱导30d表达量达到最高，滞育诱导60d、滞育解除期以及正常发育30d表达量几乎持平。本研究为揭示CsACC基因在脂代谢通路中的调控作用提供理论依据。关键词：七星瓢虫;乙酰辅酶A羧化酶;脂代谢;基因克隆;表达分析：S476.2文献标识码：ADOI：10.16688/j.zwbh.2020093Cloningandexpressionanalysisofacetyl-CoAcarboxylaseinCoccinellaseptempunctataXIANGMei1，2，XIEYingqiang2，ZHANGHongzhi2，LIYuyan2，WANGMengqing2，ZANGLiansheng1*，ZHANGLisheng2*（1.激nlinAgriculturalUniversity，Changchun130118，China;2.InstituteofPlantProtection，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Bei激ng100193，China）AbstractAcetyl-CoAcarboxylase（ACC）isarate-limitingenzymeinvolvedinthefirststepoffattyacidsynthesis.InordertoexplorethefunctionofACCinlipidmetabolismofCoccinellaseptempunctataatdiapausestage，thefull-lengthcDNAofaACCgenewasclonedusingRT-PCRandRACEtechniquebasedonthetranscriptomedatabase.ThegenewasnamedCsACC（GenBankaccessionno.MT012819）.ThefulllengthofcDNAsequenceofthisgenewas7217bpandthelengthofopenreadingframe（ORF）was6792bp，encoding2263aminoacidresidues.Thepredictedmolecularweightoftheproteinwas255.9kDawithanisoelectricpoint（pI）of5.90withoutatransmembranehelicalstructureorsignalpeptide.TheresultsshowedthatCsACChadahighhomologywiththatofTriboliumcastaneum.TherelativeexpressionlevelsofCsACCgeneindifferentstagesofnormalanddiapausedevelopmentweredetectedbyreal-timefluorescencequantitativePCR.TheresultsshowedthattheexpressionlevelsofCsACCgenereachedthehighestlevelon30thdayafterdiapauseinduction，andtheexpressionlevelswerealmostflaton60thdayafterdiapauseinductions，30thdayafternormaldevelopmentandafterdiapausetermination.Thisstudypro---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---videsatheoreticalbasisforrevealingtheregulatoryroleofCsACCgeneinthelipidmetabolismpathway.KeywordsCoccinellaseptempunctata;acetyl-CoAcarboxylase;lipidmetabolism;geneclone;geneexpression七星瓢虫CoccinellaseptempunctataL.在我国广泛分布，其捕食果树及农作物上的各种蚜虫[12]，是一种典型的捕食性农业害虫天敌，在国内外已被广泛应用[34]。七星瓢虫存在滞育现象，腹部可大量积累脂肪，滞育个体总脂含量较正常发育个体显著增加[5]。根据此现象，本研究通过七星瓢虫转录组数据分析比对正常发育组、滞育组及滞育解除组，筛选得到脂代谢中滞育关联基因，研究差异表达基因，为揭示滞育分子机制提供理论依据[67]。昆虫脂肪体是维持体内能量平衡的动力，也是在...