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  • 红三叶ISSRPCR反应体系的建立与优化

    红三叶ISSRPCR反应体系的建立与优化摘要:采用正交试验设计,对影响红三叶ISSR-PCR反应较大的4个因素(TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTP及引物)在4个水平上进行筛选,建立并优化了适合红三叶ISSR分析的最佳反应体系。在25UL反应体系中各反应物的最适含量为40ng模板DNA,10XPCR-buffer2.5uL,2.5mmol/LMg2+,2.5UTaqDNA聚合酶,引物1umol/L,0.2mmol/LdNTP。反应程序为:94°C预变性5min;94°C变性30s,引物退火30s,72°C延伸1min,循环35次...

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